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發布時間:2020-10-31 10:50  






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PCR核酸檢測技術在新冠肺yan疫情檢測中發揮了重要作用,但由于該技術將待檢測核酸多次擴增,所以非常小污染也容易導致假陽性結果。PCR實驗室建設中的污染不僅會影響實驗的質量和結果,還會危害實驗室工作人員的健康。
PCR實驗室建設完成,進行實驗過程中易發生污染產生污染主要原因:
① 這也是常見的污染原因。重復擴增后,PCR產物的黏貼遠遠超過PCR的檢測限制,所以即使是少量的污染也足以造成假陽性結果。
② 試劑的污染。在試劑的配制過程中,接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導致試劑被污染。
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目前,PCR實驗室建設的應用得到了快速的發展,已成為疾病診斷和疫情控制的有力工具。為避免污染和聚合酶鏈反應方法中的假陽性和假陰性現象以及保證結果的準確性,應嚴格設計獨立的實驗室區域,明確職能分工,確保實驗室環境整潔,嚴格劃分人員和物流,設計合理的壓力梯度,形成有序的氣流組織方向,有效避免交叉污染。
避免污染是PCR實驗室建設和設計中的首要考慮,由于PCR技術的高度敏感性,PCR技術要求高、影響因素多,從樣品制備到結果的產生,任何一處細微的失誤均會造成結果的偏差,導致樣品的假陽性和假陰性結果。
在聚合酶鏈反應實驗室研究過程中,許多操作都會產生氣溶膠,如離心和混勻等操作閔。為保證環境安全,PCR實驗室設計建設需獨立區域設計,避免與其余環境的交叉混雜。
PCR實驗室區域的劃分
1.功能分區:試劑制備區、標本制備區、擴增反應一區、純化區、擴增反應二區和后純化區
2.設計原則
根據國家衛生bu,的要求,實驗區一定喲啊相互獨立,不能直接相連。每個獨立實驗區設有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋,進入各工作區域一定要嚴格遵循單一方向順序,即只能從左邊試劑準備區,標本制備區,擴增反應一區,純化區,擴增反應二區到后純化區,避免發生交叉污染。
3、為避免樣本間的交叉污染,房間采取凈化控制,總體設計為10萬級。閘間(緩沖間)設計為正壓區,保證與外界環境隔離,避免從鄰近區域進入本區域的氣溶膠污染。