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為什么反相填料C18使用時建議溶液的PH范圍是2-8？

C18填料是十八烷1基硅1烷鍵合硅膠，pH值超出酸性范圍時，鍵合相十八烷1基易發生水解而流失；當流動相pH超出堿性范圍時，會加速硅膠的溶解。這兩種反應均是不可逆的反應，會影響填料的性能。

當我們極端pH條件下需要使用反相填料時，建議使用聚合物基質的反相填料，如HLB,PSD等，聚合物基質的填料pH耐受范圍是1-14，適用范圍非常廣哦。

SPE小柱的使用過程

下面我們設定填料為保留目標化合物，分析過程如下：

1、預洗活化——除去柱子內的雜質，飽和平衡柱。依次用強溶劑、弱溶劑（緩沖溶液）進行活化。

2、上樣——將樣品（包括分離物和干擾物）用一定的溶劑溶解，轉移入柱并使組分通過吸附劑，吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物。

3、淋洗——用適當的溶劑淋洗吸附劑，使先前保留的干擾物選擇性的淋洗掉，分離物富集保留在吸附劑上。

4、洗脫——用小體積的溶劑將被測物質從吸附劑上洗脫下來并收集。

反相萃取吸附機理。

反相作用機理：

對于通過非極性作用力吸附在非極性SPE柱上的目標化合物，可以用具有非極性性質的溶劑洗脫，如氯1仿、環1己烷、乙1酸乙酯等。廣州碩譜生物科技有限公司Florisil固相萃取柱廠家色譜柱維護-反相柱樣品zui好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。只要溶劑的洗脫強度足以破壞目標化合物與吸附劑非極性官能團之間的范德華力，就可以順利地將目標化合物從SPE柱上洗脫下來。即便是極性較強的甲1醇，對于許多化合物來說也具有足夠的非極性作用力將其洗脫。有時單一溶劑不能把疏水性強的目標化合物完全洗脫下來，則可考慮使用二氯1甲1烷：乙1酸乙酯（1：1，體積比）。

色譜柱維護-反相柱

樣品

zui好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。B：甲1醇流速：1mL/min進樣量：5μL柱溫：35℃檢測波長：280nm。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應含有任何顆粒物，zui好使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑（例如，流動相為水，樣品溶劑為甲1醇），為達到較好峰形，需要降低進樣量（以250x4.6mm規格為例，小于10μL）。

近二十年來，固相萃取已逐步發展成為一種有效的分離和純化手段，在藥品純化、精細化學品制備、影像分析、環境分析、生命科學等領域都發揮著不可替代的作用。

固萃取又稱固相萃取，液固萃取。分離技術結合了選擇性保留和選擇性洗脫等工藝過程。該方法主要應用于樣品的分離提純濃縮，與傳統的液萃取法相比，可提高分析物的回收率，有效分離，減少預處理過程，操作簡便，節省時間和人力。

近幾年來，小柱固相萃取技術發展迅速，已在食品、環境、醫i藥等行業得到廣泛應用，成為樣品前處理和凈化的有效手段之一。然而，用戶在使用固相萃取柱時也會遇到各種各樣的問題。

依據多年的實驗應用經驗，現將使用過程中的常見問題及解決方法整理，方便大家應付固相萃取的常見問題。

固相萃取操作中常見的問題如下：

回收率低

當一個完整的 SPE操作過程中，目標化合物可能存在于出樣溶液、淋洗液、洗脫液或吸附劑中，當“目標物不能回收或回收率低”現象出現時，可以向樣品溶液中加入標液，然后進行完整 SPE操作，分別收集出樣液、淋洗液和洗脫液進行分析，首先確定目標化合物存在于哪一部分，然后確定問題來自以下幾個環節：

1.目標化合物對吸附劑的保持力不足；

2.目標化合物未完全洗除；

3.其它環節。