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發布時間:2021-08-29 15:58  





PCR儀基本要素
基本的PCR須具備
1.要被拷貝的DNA模板 Template
2.界定拷貝范圍兩端的引物Primers.
3.DNA聚合酶Taq. Polymearse
4.合成的原料(四種脫氧核苷酸)及水。
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PCR儀反應步驟
分別是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。
所謂 Denaturing乃是將DNA加熱(至90~95℃)變性, 將雙股的DNA加熱后轉為單股DNA以做為拷貝的模板. 而Annealing 則是令 Primers于一定的溫度下(冷卻至55~60℃)附著于模板DNA兩端。 然后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下(加熱至70~75℃)進行引物的延長 Extension of primers及另一股的合成。PCR的在早設想核酸研究已有100多年的歷史,二十世紀60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術,Korana于1971年早提出核酸體外擴增的設想:“經過DNA變性,與合適的引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復該過程便可拷貝tRNA基因”。
PCR基因擴增儀
聚合酶鏈式反應,簡稱PCR。聚合酶鏈式反應,其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個周期,循環進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。
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