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熒光分光光度計(jì)種類

熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、用樣量少、方法簡便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點(diǎn)，可以廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和藥理學(xué)、有機(jī)和無機(jī)化學(xué)等領(lǐng)域。熒光分光光度計(jì)的發(fā)展經(jīng)歷了手控式熒光分光光度計(jì)，自動(dòng)記錄式熒光分光光度計(jì)，計(jì)算機(jī)控制式熒光分光光度計(jì)三個(gè)階段；熒光分光光度計(jì)還可分為單光束式熒光分光光度計(jì)和雙光束式熒光分光光度計(jì)兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計(jì)，配有壽命和相分辨測(cè)定的熒光分光光度計(jì)等。

熒光光譜特點(diǎn)

靈敏度更高  g/ml，應(yīng)用不如UV廣泛。應(yīng)用：①直接熒光光度法②作為HPLC的檢測(cè)器（用的多）根據(jù)物質(zhì)分子吸收光譜和熒光光譜能級(jí)躍遷機(jī)理，具有吸收光子能力的物質(zhì)在特定波長光（如紫外光）照射下可在瞬間發(fā)射出比激發(fā)光波長長的光，即熒光。 分子受特定光照射后處于激發(fā)態(tài)的 分子返回基態(tài)時(shí)發(fā)出熒光, 其熒光強(qiáng)度與 呈線性關(guān)系, 從而可測(cè)出氣體濃度。當(dāng)檢測(cè)儀器系統(tǒng)確定后，熒光總光強(qiáng)I與 濃度的之間的關(guān)系可表示為：I=KC在穩(wěn)定的條件下，這些參數(shù)也隨之確定，k可視為常數(shù)。因此，式中I=kC表示的紫外熒光光強(qiáng)I與樣氣的濃度C成線性關(guān)系。這是紫外熒光法進(jìn)行定量檢測(cè)的重要依據(jù)。

熒光光譜體系間跨越

是處于激發(fā)態(tài)分子的電子發(fā)生自旋反轉(zhuǎn)而使分子的多重性發(fā)生變化的過程。分子由激發(fā)單重態(tài)跨越到激發(fā)三重態(tài)后，熒光強(qiáng)度減弱甚至熄滅。含有重原子如碘、等的分子時(shí)，體系間跨越為常見，原因是在髙原子序數(shù)的原子中，電子的自旋與軌道運(yùn)動(dòng)之間的相互作用較大，有利于電子自旋反轉(zhuǎn)的發(fā)生。另外，在溶液中存在氧分子等順磁性物質(zhì)也容易發(fā)生體系間跨越，從而使熒光減弱。

熒光光譜

熒光分析法的特點(diǎn)是靈敏度高，對(duì)某些物質(zhì)的微量分析可以檢測(cè)到 克數(shù)量級(jí)，如污水中的銀含量用熒光分析法可以檢測(cè)到 克，可以檢測(cè)到 克。對(duì)一些亦可檢測(cè)到 克。熒光分析的靈敏度比分光光度法的靈敏度高2~3個(gè)數(shù)量級(jí)，這是由于熒光分析的熒光和入射光之間成直角，而不在一條直線上，所以是在黑背景下檢測(cè)熒光。而分光光度法的與入射光在一條直線上，所以它是在亮背景下檢測(cè)。因此熒光分析法比分光光譜法靈敏度高。分光光譜法的靈敏度一般只能檢測(cè)到 克，兩者相差三個(gè)數(shù)量級(jí)。當(dāng)然熒光分析法比起帶電子顯微鏡的電子探針法靈敏度又低一些，然而電子探針儀器價(jià)格昂貴，使用不方便。