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細胞實驗介紹——細胞運動能力檢測：

細胞劃痕實驗是體外模擬細胞遷移能力和修復能力快捷的檢測方法。在長滿的細胞培養板或者培養皿中，沿著中線使用移液器槍頭或者其他硬物劃1-3條平行的直線，去除中線的細胞，細胞在0h、12h、24h后，觀察細胞往中線遷移情況，判斷細胞遷移能力。

一般流程：細胞接種培養-劃痕-不同時間點拍照

細胞遷移和侵襲實驗是體外模擬細胞遷移和侵襲能力的檢測方法。使用不同孔徑的聚碳酸酯膜transwell小室放入培養板中，將細胞接種于小室中，利用培養液成分的差異誘導細胞運動，檢測細胞的遷移和侵襲能力的差異。

一般流程：transwell小室準備-細胞接種-細胞培養-transwell小室染色-顯微鏡拍照

結果示例：

                                       圖 A 細胞劃痕實驗圖；B，C 細胞遷移和侵襲實驗圖

MTT檢測

MTT 是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活xi胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。集，常呈新月形，核膜皺褶，胞質緊實，細胞器集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小體和調亡小體被臨近巨噬細胞吞噬現象。二jia基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶聯免yi檢測儀在 570nm 波長處測定其光吸收值，可間接反映活xi胞數量。

透射電鏡自噬小體檢測

胰酶消化，收集作用后的細胞，離心，先將細胞塊固定在2.5%成二醛和0.1%的PBS溶液中保存在4C中過夜。

再用乙醇梯度脫水，接下來用環氧樹脂浸透并切成薄片。隨后超薄切片用銅網固定，后用重金屬醋酸雙氧鈾和檸檬酸鉛染色。通過TEM分析凋亡細胞內超微結構變化，拍照保存。

貼壁細胞:先倒出培養液，采用胰蛋白酶消化或者用細胞刮(會產生碎屑)刮下:帶培養液進行離心，100-1500/mim 5 10min。離心完畢倒出培養液。LeageneMDC染色液適用于培養細胞的自噬染色，可與EB合用雙染。管底的細胞團不要打散， 沿管壁倒入適量(一般為材料體積的5-10倍)的2.5-3.5%成醒固定液，固定約1h-2h. 也可在4C冰箱過夜。