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              發(fā)布時(shí)間:2021-09-26 03:52  






              拉曼光譜儀

              拉曼光譜具有明顯的優(yōu)勢(shì),主要包括:水的拉曼散射很微弱,是研究水溶液中的生物樣品和化學(xué)化合物的理想工具;波數(shù)范圍廣,可對(duì)有機(jī)物及無(wú)機(jī)物進(jìn)行分析;拉曼光譜具有指紋圖譜特點(diǎn),譜峰分辨率高、清晰尖銳,適合進(jìn)行不定項(xiàng)檢測(cè)等;抗干擾能力強(qiáng),無(wú)需進(jìn)行復(fù)雜的樣品準(zhǔn)備,可進(jìn)行快速分析;對(duì)測(cè)試樣品的量要求少,只需要少量的樣品就可以實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。

              同時(shí),隨著納米增強(qiáng)試劑和光源技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用,使基于拉曼光譜的檢測(cè)技術(shù)得到了廣泛的發(fā)展和應(yīng)用。目前,這一技術(shù)已被廣泛用于食品安全、環(huán)境科學(xué),公共安全、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域,成為檢測(cè)市場(chǎng)中一個(gè)熱點(diǎn)。




              為什么拉曼光譜儀器不工作?

              檢查儀器和所有附件插座都插好并接通電源。

              保證激光器(如果附帶電源)都插好并接通,由于激光器有不同種類(lèi),可參照每個(gè)激光器的說(shuō)明書(shū)獲取進(jìn)一步的幫助。

              在有兩個(gè)或多個(gè)激光器的系統(tǒng)中,確保聯(lián)鎖系統(tǒng)設(shè)置在正確的位置上,正確的激光器被接通。

              檢查儀器的外罩處于安全的關(guān)閉狀態(tài),聯(lián)鎖裝置正在運(yùn)轉(zhuǎn)。

              如果以上操作都已經(jīng)檢查過(guò),你就可以準(zhǔn)備進(jìn)行光譜測(cè)試了。將樣品放置在顯微鏡下,啟動(dòng)光譜操作軟件,如果你仍不能得到光譜,檢查下面各項(xiàng)。

              保證樣品被正確地放置在顯微鏡下,即樣品被準(zhǔn)確地聚焦并照射在樣品正確的位置上。測(cè)量時(shí)經(jīng)常需改變不同的測(cè)試區(qū)域以避免因樣品不純帶來(lái)一些非期望結(jié)果的可能。

              保證激光正確輻照在樣品上,保證顯微鏡光圈的孔徑設(shè)置正確并處于正確的位置上(不同品牌的拉曼光譜儀按各自的要求處理)。

              檢查所有軟件窗口的設(shè)置是否正確。

              檢查成像區(qū)域設(shè)置窗口的數(shù)值并保證激光像點(diǎn)處于該區(qū)域的中心。標(biāo)準(zhǔn)成像區(qū)域應(yīng)該是激光像點(diǎn)中心垂直方向兩邊各10個(gè)像元。檢查狹縫的設(shè)置,當(dāng)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)操作時(shí),狹縫應(yīng)為50μm。

              如果CCD探測(cè)器飽和了,你將得不到任何有用的信息。可采用降低激發(fā)光功率或提高儀器的共焦程度來(lái)避免。

              當(dāng)檢查完上述各項(xiàng)后,你應(yīng)該可以得到一張樣品的拉曼譜圖。如你仍然不能得到譜圖,可先嘗試測(cè)試單晶硅的拉曼譜。單晶硅是良好的拉曼散射體,可以用來(lái)幫助驗(yàn)證儀器的性能。如果用單晶硅樣品可以獲取硅的520cm-1峰,再?lài)L試測(cè)試樣品。現(xiàn)在你可以得到樣品的拉曼信號(hào),但可能噪聲較大。在這種情況下,可參照Q4的建議來(lái)提高信噪比和信背比。



              拉曼光譜儀為什么待測(cè)樣品的信號(hào)很弱?信噪比很差?

              當(dāng)進(jìn)行樣品測(cè)試時(shí)發(fā)現(xiàn)拉曼光譜信號(hào)很弱,首先要檢查樣品是否正確放置在顯微鏡下并且處于聚焦?fàn)顟B(tài)。你也可以將測(cè)試區(qū)域移到樣品的另一個(gè)部位。同時(shí)檢查儀器是否處于常規(guī)狀態(tài)而不是處在共焦?fàn)顟B(tài)。如果激光功率小于100%,應(yīng)嘗試提高功率增強(qiáng)信號(hào)。如果光譜噪聲很大,可采用增加掃描積分時(shí)間或積分次數(shù)來(lái)提高信噪比。

              增加掃描積分時(shí)間可以讓CCD獲取更多的拉曼信號(hào),增強(qiáng)整個(gè)無(wú)關(guān)噪聲的特征。該法適宜于當(dāng)背景和拉曼信號(hào)都低的情景。當(dāng)兩者都不強(qiáng)時(shí),增加積分時(shí)間只會(huì)增加CCD探測(cè)器飽和的機(jī)會(huì)。

              對(duì)幾個(gè)特定的掃描光譜進(jìn)行數(shù)據(jù)疊加可以增強(qiáng)隨機(jī)背景噪聲下的拉曼信號(hào),增加信噪比。

              適當(dāng)選擇掃描積分時(shí)間和積分次數(shù)可獲得很大可能的曝光度增加信噪比。不過(guò)要注意一點(diǎn):信噪比跟積分次數(shù)的平方根成正比,疊加四次可獲得二倍信噪比的提高。

              另一個(gè)與信噪比密切相關(guān)的參數(shù)是信背比。如果背景部分很高,將會(huì)湮蓋拉曼信號(hào)只給出系統(tǒng)噪聲。





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