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發布時間：2020-11-02 07:30
低溫生物菌種的影響因素有哪些
菌的質量：保藏的菌種應培養在營養豐富的條件下，使之進入穩定期，稍老一些的菌體對環境抵抗力強。另處，作為冷凍干燥的菌懸液細胞濃度要高不同的菌對冷凍干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液細胞濃度不高，就會使以后傳種造成困難，保存期也會受到影響。
保護劑：不同種類的保護劑對不同微生物的作用是不同的，如個別菌種在脫脂乳作保護劑的情況下失敗率高達99.99%，而采用葡聚糖等混和保護劑時失敗率大大減少。一般情況下，那些容易保存的菌種對保護劑的要求不很嚴格，而不易保存的菌種對保護劑的要求卻很苛刻。因此，選擇好的保護劑是冷凍干燥保存菌種的關鍵因素。
干燥速度：實驗表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率為67.3%，而3h為59%。
空氣的影響：冷凍干燥后空氣對細菌細胞影響較大，可導致細胞損傷進而失敗，故在凍干后應立即在真空下融封，才有利于長期保存。
溫度的影響：在干燥和真空狀況下溫度的影響遠沒有上述幾項因素重要，因此可以在室溫下保存，但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。
含水量的影響：水分含量過高對菌存活不利，完全脫水也不利于保存，一般把干燥后的細胞含水量控制在3%以下(1%-3%)
低溫生物菌種的篩選分離
篩選：工業發酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩，挑選具有某種能力的有用菌種。
分離：首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品，用無菌水稀釋后，涂布于置有適宜細菌、霉菌生長的瓊脂培養基平皿上，并將其倒置于恒溫箱中，培養一定時間，平皿上長出的許多單個菌落（單一微生物的集落）經分別分離后即為各種純種菌株，簡稱純種，移種至試管斜面培養基上，置4℃冰箱備用。
篩選模型：根據不同的篩選目的，采用不同的篩選模型。如常規篩選菌種的方法是將土壤中分離所得的純種，在含有瓊脂培養基的平皿上培養后，用打孔器將菌塊移至含有試驗菌的瓊脂培養基上，在適宜的溫度下培養一定時間后取出，如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈，則表明此菌種具有產生抑制試驗菌生長的菌種物質的能力。所得菌種經過搖瓶液體發酵，測定發酵液或菌絲體內菌種的含量，選出生產能力高的菌種。另一方面對所提取的菌種進行結構分析、藥理試驗及臨床試驗等，確為有效者，即可作為生產菌種。又如篩選脂肪酶生產菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養基上，恒溫培養一定時間，如菌落周圍出現透明圈的，則該菌具有分解脂肪的能力，進一步作搖瓶發酵測定酶活力，挑選產量高者作生產菌種的出發菌株。
低溫生物菌種烘干方法
微生物菌種低溫烘干裝置是用于對微生物菌種進行烘干使用的裝置，通過產生較低的熱量，對微生物菌種進行長時間的烘干，在不破壞微生物菌種的同時去除微生物菌種中的水分，廣泛的使用在微生物菌種的培育實驗場合，而微生物菌種低溫烘干裝置已經無法滿足人們的使用，需要更方便使用的微生物菌種低溫烘干裝置；在微生物菌種低溫烘干裝置使用時，無法對放置的微生物菌種進行旋轉，導致了微生物菌種受熱面積不夠均衡，從而烘干的不夠徹底，同時，不能夠對放置的位置和高度進行調整，從而不方便不同體積的微生物菌種器皿擺放進行烘干。
低溫生物菌種的分離方法有哪些？
先將所需的種藥用真菌采集回來，選取新鮮、個體大、壯實、中齡及無病蟲害的子實體（或菌核、菌索），作為分離用的材料。若為子實體，取其菌蓋或菌柄組織；若為菌核，取其全部或部分（如茯苓）菌核；若為菌索，取其部分根狀菌索（如蜜環菌）。再用0.1 %或75 %酒精進行表面消毒2 分鐘，用無菌水（或冷開水）沖洗數次，洗凈殘留的藥液后切成小塊。，然后，放入PDA 培養基的試管或培養皿上，置24 ～26℃溫度下，培養5 ～ 7 天。在分離的真菌組織周圍見長有白色菌絲時，應及時將菌絲移至斜面試管培養基上，再置溫度24 ～26 ℃下培養7～10 天，即得純菌種。所得的純菌種還可繼續擴大培養或保藏。
