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發布時間:2021-01-12 15:08  





工業合成:三羥本身由于結構簡單,以中心碳原子呈四面體結構,含三個羥和一個氨基,可以進行多種取代和氧化還原反應,是一種化工合成原料。緩沖劑TAPS的一種合成方法就是利用Tris和1,3-丙磺酸內酯在醇中合成的。通常要采購用于工業合成的Tris原料對試劑純度要求不高,重點是量大,找產能較大的原料生產廠家是比較劃算的。
使用緩沖溶液的注意事項:不少緩沖溶液都含有易揮發組分,如,氨-氯化銨中的氨酷酸-中的醋酸。現在,不少實驗室引入了定量加液器,用定量加液器加試劑,具有簡便準確誤差恒定的特點,特別是在做成批樣品時更顯出它的優越性,不少同志也喜歡用它來加緩沖液,但是,應注意緩沖液不能長久存放在定量加液器中,因該器皿不密閉,易造成氨的揮發(醋酸-緩沖液中的醋酸也同理),從而,導致溶液失效,正確的做法是緩沖液應適量配制,使用后及時密閉并置于低溫中保存。
此外,一些緩沖體系對溫度非常敏感,例如Tris-HCl緩沖液,如果你在25℃時將緩沖體系調至pH值8,pH值將在5℃時增加到8.58而在37℃時降到7.71。所以,如果打算在4℃條件下保存蛋白或在37℃進行實驗,就應該考慮到室溫下調的pH值可能在實驗條件中就不適用了。 其他類型的色譜分離柱,如凝膠過濾柱和Ni2 親和層析柱,可能需要更高的鹽濃度。我一般用高達500 mM NaCl進行高鹽淋洗,以防止蛋白和柱之間的非特異性結合。