PCR 緩沖液-友名生物技術(shù)

目前的病毒核酸檢測試劑盒，多數(shù)采用熒光定量PCR方法，通過檢測熒光信號的累積來確定樣本中是否含有病毒核酸。那么，核酸檢測到底需要經(jīng)過哪些步驟呢？概括起來，是 取樣、留樣、保存、核酸提取和上機(jī)檢測五個步驟。

取樣

采集人體的分泌物。用鼻咽拭子或咽拭子擦拭鼻腔或咽后壁及雙側(cè)扁桃體處

留樣

將拭子頭浸入細(xì)胞保存液中，折斷尾部后立即旋緊管蓋

保存

將樣本管放入密封袋中保存好，并及時送檢

核酸提取

將樣本送進(jìn)實驗室進(jìn)行核酸提取

上機(jī)檢測

將提取物進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增反應(yīng)

LA PCR的原理

LA PCR的關(guān)鍵是具有3′→5′Exonuclease活性 (Proof reading活性) 的耐熱性DNA聚合酶。在PCR過程中當(dāng)有錯誤的堿基攝入時，反應(yīng)性能將大幅度下降，TaKaRa Ex Taq 和TaKaRa LA Taq 依靠3′→5′Exonuclease活性可將錯配的堿基除去，從而延伸反應(yīng)能順利地進(jìn)行下去，使長鏈DNA的擴(kuò)增成為可能。

PCR技術(shù)不僅可用于基礎(chǔ)研究，還適用于日常的臨床診斷、法醫(yī)學(xué)調(diào)查和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究。這些應(yīng)用要求可靠的性能、及時的靈敏度和嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。因此，PCR 緩沖液，所使用的PCR儀和PCR試劑必須符合這些要求和目的。

分子診斷應(yīng)用包括基因檢測、致癌突變檢測以及感1染性疾病檢測。在法醫(yī)學(xué)中，利用 PCR進(jìn)行人類身份鑒定是通過對特別的短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）進(jìn)行擴(kuò)增而區(qū)分個體的。在農(nóng)業(yè)學(xué)中，PCR在食物病原體檢測、育種植物基因分型和 GMO測試中具有重要作用。

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