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              發布時間:2021-01-20 22:02  






              ELISA試劑盒的測定原理

              測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應,所以任何的診斷劑離不開好的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原動物后獲得的多抗體和使用雜交瘤技術得到的抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等測定試劑幾成為現實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現。



              ELISA試劑盒的組成結構

              1、 操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

              2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

              3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

              4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

              5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

              此IBL試劑盒能用于小鼠清,EDTA血漿,細胞上清中白介素-6的定量檢測。




              ELISA試劑盒的發展前景

              臨床測定技術的發展主要在于方法學的發展,而方法學的發展依托于試劑生產技術不斷進步更新和型標記物的應用。分子生物學正在并肯定會讓對整個生命科學有一個徹底的認識,其對測定技術發展的影響也是直接而又有效的,對以前一些難以檢測的生物活性物質的測定,并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。

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              ELISA試劑盒——會出現的問題及解決辦法

              標準曲線線性不佳,或是平行性不好。

              a.原因:溫育位置避光不好或受到氣流干擾。

              解決辦法: 請確認溫育位置既不透光也不透風(如抽屜內)。

              b.原因:操作時間拖太久。

              解決辦法:請在方法熟練后再進行操作。

              c.原因:微孔間相互污染。

              解決辦法: 加樣品時,請小心勿濺出微孔外,以免造成其它微孔的污染。

              d.原因:標準品或酶標記物所加入的量不一致。

              解決辦法:請使用已校正過的移液槍,并確保其與吸頭之間有高度密合性。

              e.原因:添加樣品或試劑的操作方法不正確。

              解決辦法:加樣品或試劑時,吸頭請勿接觸微孔。

              f.原因:洗板過程發生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進行下一步驟)。

              解決辦法:請隨時監控洗板過程,洗完后立即進行下一步驟。



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