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發布時間:2020-12-14 10:18  





熒光顯微鏡——落射光裝置
新型的落射光裝置是從光源來的光射到干涉分光濾鏡后,波長短的部分(紫外和紫藍)由于濾鏡上鍍膜的性質而反射,當濾鏡對向光源呈45。傾斜時,則垂直射向物鏡,經物鏡射向標本,使標本受到激發,這時物鏡直接起聚光器的作用。同時,濾長長的部分(綠、黃、紅等),對濾鏡是可透的,因此,不向物鏡方向反射,濾鏡起了激發濾板作用,由于標本的熒光處在可見光長波區,可透過濾鏡而到達目鏡觀察,熒光圖像的亮度隨著放大倍數增大而提高,在高放大時比透射光源強。它除具有透射式光源的功能外,更適用于不透明及半透明標本,如厚片、濾膜、菌落、組織培養標本等的直接觀察。研制的新型熒光顯微鏡多采用落射光裝置,稱之為落射熒光顯微鏡。
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熒光顯微鏡的標本制作要求
1、載玻片
載玻片厚度應在0.8~1.2mm之間,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激發光在標本上聚集。載玻片必須光潔,厚度均勻,無明顯自發熒光。有時需用石英玻璃載玻片。
2、蓋玻片
蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強激發光 ,也可用干涉蓋玻片,這是一種表面鍍有若干層對不同波長的光起到不同干涉作用的物質(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過,而反射激發光,這種反射的激發光可激發標本。
3、標本
組織切片或其他標本不能太厚,若太厚激發光大部分消耗在標本下部,而物鏡直接觀察到的上部不充分激發。另外,細胞重疊或雜質掩蓋,影響判斷。
4、封裱劑
封裱劑常用甘油,必須無自發熒光,無色透明,熒光的亮度在pH8.5~9.5時較亮,不易很快褪去 。
5、鏡油
一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標本時,必須使用鏡油,盡量使用無熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對圖像質量略有影響。
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使用熒光顯微鏡的注意事項
老上光儀器廠專業生產、銷售熒光顯微鏡,以下信息由老上光儀器廠為您提供。
(1)嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作,不要隨意改變程序。
(2)應在暗室中進行檢查。進入暗室后,接上電源,點燃超高壓燈5~15min,待光源發出強光穩定后,眼睛完全適應暗室,再開始觀察標本。
(3)防止紫外線給眼睛的損害,在調整光源時應戴上防護眼鏡。
(4)檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,超高壓燈發光強度逐漸下降,熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,不得超過2~3h。