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蛋白質結晶方法

結晶方法(Crystallization Techniques)1.1.1 分批結晶(Batch Crystallization) 這是老的簡單的結晶方法，其原理是同步地在蛋白質溶液中加入沉淀劑，立即使溶液達到一個高過飽和狀態。幸運的話，不需進一步處理即可在過飽和溶液中逐漸長出晶體。一個用于微分批結晶的自動化系統已被Chayen等人設計出（1991，1992），其微分批方法中，他們在1-2μl包含蛋白質和沉淀劑的液滴中生長晶體。液滴被懸浮在油（如石蠟）中，油的作用是作為封層以防止蒸發，它并不干擾普通沉淀劑，但是干擾能溶解油的(Chayen, 1997; see also Chayen, 1998)。

蛋白質晶體板相互作用

蛋白質分子的結構層次蛋白中的多肽鏈往往不是一個如圖4圖4所示完全伸展的鏈。L.C.鮑林和R.B.科里曾由氨基酸、小肽和有關化合物晶體結構的測定中歸納了肽鍵的鍵長、鍵角等。鏈中肽鍵N-C的鍵長為1.32埃，具有40%的雙鍵成分，與周圍四個鍵是共面的，且N-H和C=O具有反式構型。肽鍵因具雙鍵成分而無旋轉的自由，但它周圍的每個Cα原子與相鄰兩個肽鍵中的氮和碳原子所形成的Cα-N和Cα-C單鍵都具有較大的回旋余地，從而一個多肽鍵可能存在于不計其數的構象或立體結構中，其中有些構象使未成鍵原子間形成較多較強的氫鍵并產生其他能使整個分子趨于穩定的相互作用。

蛋白結晶板

獲取蛋白質晶體是蛋白質三維結構解析,藥品生產,自組裝納米體系構建等過程中重要的步驟.例如,利用X射線衍射技術對蛋白質進行三維結構解析時,首先需要通過結晶條件篩選,獲得質量較高的蛋白質晶體,進而進行衍射得到蛋白質結構相關信息.蛋白質結晶需要經歷從未飽和區經亞穩區至形核區的形核過程以及從形核區到亞穩區的生長成熟過程.在整個蛋白質結晶過程中,形核過程是至關重要的一步.均相形核過程中,結晶體系中各個部分形核概率相同,當蛋白質結晶體系中溶液的過飽和度足夠克服形核勢壘時,在形核區發生成核,因而在低濃度的結晶溶液體系中,均相形核存在一定的局限性。