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等溫核酸試劑盒

TwistAmp Basic試劑盒:

可實現DNA擴增。包含DNA擴增所需的所有酶和試劑，用戶只需提供引物和模板;新貨號產品通過單鏈結合蛋白SSB和dNTP原料進行優化，提高靈敏性，增強RPA反應效能。使用TwistAmp Basic時，即使PCR引物也有效。TwistAmp Basic已被用于固相、加尾引物、配基、電化學和微陣列等應用。

非常適用于:終點凝膠電泳 DNA檢測、下游應用。

核酸試劑盒

恒溫擴增技術

取代PCR的核酸擴增術﹐

領域:廣泛應用于臨床診斷，食品安全檢測，動物疾病檢測等領域特點:快速，特異，無需專門設備

類型:1．滾環核酸擴增( rolling circle amolification，RCA)

2.環介導等溫擴增( loop-mediated isothermal amplification，LAMP)3.鏈替代擴增( strand displacement amplification)

4.依賴核酸序列擴增( nucleicacid sequence based amplification ,NASBA)

5.解鏈酶擴增( helix dependent amplification，HAD)

RPA技術主要依賴于三種酶：能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應溫度在37°C左右。

重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發生鏈交換反應形成并啟動DNA合成，對模板上的目標區域進行指數式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合，防止進一步替換。在這個體系中，由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非?？?/span>，一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物。RPA擴增的基礎體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴增所需的所有試劑，我們只要準備好引物和模板就行。擴增結果可以通過凝膠電泳進行終點檢測，產物純化后可用于下游研究。

在這個基礎體系中添入不同的酶和探針，就可以實現多樣化的RPA應用。舉例來說，TwistAmp? exo結合了exo探針技術和核酸外切酶III，能實現數據的實時讀取，就像熒光定量PCR一樣。不過反應終點的擴增子總量有所減少，適合獲得強熒光信號進行動力學分析，不適合終點檢測(比如跑膠)。將exo探針技術、核酸外切酶III和逆轉錄酶結合起來，可以一步實現RNA模板的實時擴增。

“強烈推薦CT影像作為目前新冠的診斷方法”，她表示，“病毒核酸檢測是確診新型冠狀病毒無創診斷的金標準，然而檢測結果‘CT陽性、核酸陰性’的結果，可能影響臨床排查。目前新型冠狀病毒核酸檢測特異性高、敏感性偏低，不排除存在部分假陰性?！?

在現實中，也出現了核酸試劑盒檢測數次陰性，卻確診為新冠的案例。