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低溫生物知多少？

實驗室的傳代保藏過程

1. 按說明書要求復溶菌粉，轉種于適當的增菌培養基內（G1），復壯后轉接至平板上，并于適當溫度下培養適當時間，分離出單個純種菌落，此為第2代（G2）。

2. 鑒定完成后，挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管，同時挑取純菌落轉接斜面作為工作用。此時，保藏為第2代，但工作用則為第三代。

3. 將第2代管冷凍保存，將工作用于適當溫度下培養適當時間后可用于試驗。

4. 取一支冷凍保存的G2代轉種于平板和斜面培養基上，平板上的制成冷凍保藏管第三代（G3），斜面培養基經適當溫度下培養適當時間后用作工作用（W3）。

5. 將第三代（G3）冷凍或低溫保存，將生長、轉種后的G2經滅菌處理后丟棄。

6. 當工作用代數小于5時，可直接用上一代工作用轉接下一代工作用，如W3可直接轉接為W4。

7. 按上述程序操作，直至G4轉為W5為止，需重新開啟安瓿，再重復上述操作程序、保藏和使用。

以上方法中，被分為兩類。傳代用和工作用，傳代用用于甘油冷凍管法保藏，工作用用斜面低溫保藏法保藏。

實驗證明，甘油冷凍管的有效期至少為2年，但其主要適用于細菌（需氧）、酵母菌的傳代、保藏、真菌和芽孢類細菌則需應用其它方法。

微生物菌種的作用

刺激作物生

有些微生物肥料中的微生物還可分泌植物類物質、維生素等，刺激和調節作物生長發育。例如，固氮菌等能夠產生多種活性物質(生長素、環己六醇、泛酸、吡哆醇、硫胺素等)，固氮菌培養物中可檢測到3-乙酸；熒光假單孢菌的所有菌株均能產生赤素和類赤素物質，部分菌株還能產生乙酸，少數菌株能合成生物素和泛酸；叢枝菌根真菌能誘導牧草植株產生細胞分裂素(CTK)，改變脫落酸(ABA)與赤素的比例。

低溫生物菌種——特點介紹

菌種的有效性

菌種的有效性微生物是微生物肥料的核心，這些菌種是針對不同作物和土壤類型，通過人工篩選或生物工程技術選育、改造并經過大量科學試驗后，獲得的優良菌株。由于核心菌種或菌株生理生化功能的差異，不同微生物肥料功效也不一致。以根瘤菌為例，菌株固氮能力差異很大，有的菌株甚至不具固氮能力。

生物菌種存活必備條件

1、保持土壤合理濕度

高溫悶棚前，菜農多進行土壤翻耕，使得澆水水量極大，土壤濕度過高，通透性差，影響生物菌的增殖。因此，悶棚澆水時，要先起壟，澆小水保證土壤較為濕潤即可，不要大水漫灌。

2、閉棚后不要立即升溫

底肥需要生物菌發酵，若翻入土壤后立即澆水升溫，多數菌種被扼殺，僅有少量嗜熱菌可以存活，但糞肥發酵僅靠嗜熱菌是完成不了的。

建議菜農翻地澆水后間隔幾天，待土壤濕度降低，生物菌大量繁殖后再覆蓋地膜、關閉通風口進行悶棚，此時低溫菌種已經發揮作用，可以產生大量熱量輔助悶棚，可大大改善悶棚效果。

3、促進生物菌快速繁殖

想要促進微生物快速增殖，可使用菌種含量高的菌劑，例如20億的，可充分發揮菌劑作用。菜農要學會換位思考，生物菌喜歡什么樣的條件，就創造什么樣的條件，如此才能確保悶棚效果。