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PCR實驗進行條件：1、必須擁有標準的的PCR熒光實驗室；實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國AppliedBiosystems公司推出由于該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前已得到廣泛應(yīng)用。二、PCR實驗室工程的設(shè)計要點：PCR實驗室可以是分散形式，也可以是組合形式。本文試就其定量原理、方法及參照問題作一介紹；

各實驗區(qū)之間的試用劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進行。2.實驗室空調(diào)通：風系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求，但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性直采用全送全排的氣流組織形式。⑹管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生，而且管子不能用力崩開，這樣會產(chǎn)生氣溶膠。同時，要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。2.1試用劑貯存和準備區(qū)該實驗區(qū)主要進行的操作為貯存試用劑的制備、試用劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。

在巢式PCR測定中，通常在一輪擴增后必須打開反應(yīng)管，因此巢式擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進行。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。頂板生產(chǎn)出廠時，其表面覆蓋有塑料薄膜以防止頂板在運輸及安裝過程中造成損壞。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進行。2.4擴增產(chǎn)物分析區(qū)：該區(qū)域主要進行的操作為擴增片段的測定。如使用全自動封閉分析儀器檢測，此區(qū)域可不設(shè)。本區(qū)是尤為主要的擴增產(chǎn)物污染來源，因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。