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發布時間:2021-03-23 06:15  





熒光定量PCR儀的技術原理
萊普特——熒光定量PCR儀專業供應商,我們為您提供以下信息。
所謂real-time Q-PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基因,利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在 real-time 技術的發展過程中,兩個重要的發現起著關鍵的作用:(1)在90年代早期,TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發現,它能降解特異性熒光記探針,因此使得間接的檢測PCR產物成為可能。(2)此后熒光雙標記探針的運用使在一密閉的反應管中能實時地監測反應全過程。這兩個發現的結合以及相應的儀器和試劑的商品化發展導致real-time Q-PCR方法在研究工作中的運用。
熒光定量PCR儀的原理
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為了便于對所檢測樣本進行比較,在real-time Q-PCR反應的指數期,首先需設定一定熒光信號的域值,一般這個域值(threshold)是以PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號 (baseline),熒光域值的缺省設置是3~15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍。如果檢測到熒光信號超過域值被認為是真正的信號,它可用于定義 樣本的域值循環數(Ct)。
熒光定量PCR儀的產前診斷應用
到目前為止,人們對遺傳性物質改變引起的遺傳性疾病還無法治,只能通過產前監測,減少病嬰出生,以防止各類遺傳性疾病的發生,如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生,從孕婦的外周血中分離胎兒DNA,用實時熒光定量PCR檢測其Y性別決定區基因是一種無創傷性的方法,易為孕婦所接受。
熒光定量PCR儀的部分應用
新的愈后指標的研究
對于疾病,在藥作用至一定程度后,就認為可以停藥了,但是應該在什么停藥,現在大都沒有一個明確的指標,現在所用的指標由于受到檢測方法的靈敏度及準確性限制,這一指標未必合理,因此有必要對治好的指標以及指標與發率以及疾病轉化為其他疾病之間的關系等進行進一步的研究,從而為藥或療法徹底治好疾病打下堅實的理論基礎。