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              寧德培養(yǎng)基批發(fā)服務(wù)為先,福州景天化學(xué)試劑公司

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              發(fā)布時(shí)間:2020-07-19 14:04  






                胎牛血清使用方法:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清,常使用的澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的Gibco FBS或者20%的澳洲胎牛血清,要根據(jù)具體 細(xì)胞選擇合適的澳洲胎牛血清濃度。





              抗體保存注意事項(xiàng):大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過程需要1-2 周的時(shí)間,所以是在4 度的條件下來完成的。4 度運(yùn)輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運(yùn)輸過程中避免干冰運(yùn)輸!特殊抗體的保存條件:1. 酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失。2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對(duì)光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的!




                血清中的沉淀物對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有什么影響?污染。磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭(zhēng)duan,研究者可能會(huì)在血清中觀察到一些 絮狀的沉淀,因此就會(huì)比較警覺的去做無菌試驗(yàn),將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天,結(jié)果可能會(huì)觀察到更多的絮狀沉淀,因此就斷定血清被污染了。并且當(dāng)研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時(shí)往往可以看到一些可以運(yùn)動(dòng)的小黑點(diǎn),因此就更加確認(rèn)是血清被污染了。于是,研究者就會(huì)花費(fèi)更多的時(shí)間和精力來和生產(chǎn)商確認(rèn),但zui終確定血清沒有被污染而只是沉淀。為了避免這些問題的發(fā)生,我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌,而是將血清加到瓊脂板上進(jìn)行培養(yǎng)以觀察是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。另外,也可以進(jìn)行革蘭氏染色,在油鏡下觀察,以確認(rèn)是否有污染。


              胎牛血清的使用注意事項(xiàng):

               1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。

              C至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

               2、解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生.

               3、請(qǐng)勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。



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