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發布時間:2021-04-18 03:30  
球形顆粒的磁性納米粒子的比表面積(表面積與體積之比)與直徑成反比。對于直徑小于0.1um的顆粒,其表面原子的百分數急劇增大,此時表面效應顯著。顆粒直徑減小,比表面積顯著增大,同時表面原子數迅速增加。當粒徑為1nm時表面原子數為完整晶粒原子總數的99%,此時構成納米粒子的幾乎所有原子都分布在表面上,在表面原子周圍形成很多懸空鍵,具有不飽和性,易與其他原子結合形成穩定結構,表現出高化學活性。因此,固定目標分子/原子。
體外應用:
生物分離和純化是生物和技術中重要的技術之一。這也是磁性粒子應用中具成果的一種。磁性分離方法具有、簡單、快速的優點。磁性粒子可用于蛋白質、核酸等生物分子和細胞的分離,核酸的分離純化是用納米級的磁性粒子。
在生物分離上,磁性納米粒子體積小、表面積大,具有分散性好,可快速有效的結合生物分子,并且這種結合是可逆的,另外絮團形成可以被控制,因而使用磁性納米粒子進行分離優于使用微米級樹脂和珠子的傳統方法。大多數分離用的磁性納米粒子是超順磁的- 在無外加磁場時,粒子無磁性,均勻懸浮在溶液中,而當使用外加磁場時,粒子具有磁性可被磁分離。磁性納米粒子表面連接的具有生物活性的吸附劑或其他配體等活性物質可與特定生物分子或細胞特異性結合,在外加磁場作用下分離。
磁性轉染(magnetofection)是將結合有載體DNA的磁性納米粒子在外界磁場影響下轉染到細胞內的方法。用于磁性轉染的磁性粒子多用多聚陽離子、多聚氮雜進行表面修飾。由于它們帶有陽性電荷,易于與帶有陰性電荷的DNA結合,與利用病毒或非病毒載體的轉染相比,轉染效率提高幾十到幾千倍。磁性轉染還具有轉基因表達提高,使用極低劑量的載體既可獲得高轉染率和高轉基因表達,使用方法簡單等優點。磁性轉染方法已成功用于多種類型的貼壁細胞及少數懸浮細胞,包括難以用常規方法轉染的原代細胞、細胞等。德國Chemicell公司生產的MagnetofectionTM磁性轉染試劑被很多的實驗室選用,并有多篇文章發表。
洗脫不充分有時候我們裂解結合液各種條件優化到了了,可是核酸得率仍然很低。這種情況有可能是磁珠結合了核酸,但是由于洗脫不充分,磁珠結合的核酸沒有被洗脫下來。首先,磁珠在晾干過程中可能干燥過度,導致核酸干結在磁珠上不能洗脫下來;第二,洗脫液體積過小導致無法充分洗脫。晾干過程中,需要觀察磁珠處于稍微濕潤的狀態即可,不能完全干燥,這樣核酸更容易溶解于洗脫液中。洗脫體積不能太少也不能太多,太少磁珠上的核酸很難洗脫充分,太多會導致濃度偏低。一般來說 0.5mg 的磁珠,洗脫液的體積為 70-100ul。