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發布時間:2021-10-14 04:33  






超級制備色譜系統
問:TFA在緩沖液中是不是只起到調節pH的作用呢?TFA的濃度越高基線的漂移越厲害,那是不是說它的濃度在緩沖液pH允許的情況下越低越好呢?
答:(1)TFA起到類似離子對的作用,一般濃度在0.05-0.1%,過高的濃度,會使溶液偏酸,長時間使用可能影響柱子壽命。
(2)同時TFA可以抑制硅膠表面硅醇基,改善堿性化合物的峰型。有時0.1%TFA分離不好的話。可以考慮加大濃度到0.2%。但要注意用完后及時沖洗色譜柱。
(3)走梯度時,因為走成基線漂移,但對制備的影響不大。
制備色譜柱子由于處理的樣品多,比分析柱子更容易受污染,所以,必要的前處理就顯得非常的必要。萃取、過濾、結晶、固相萃取等簡單的分離方法,如果用得上,而且還不是很麻煩,就要盡可能多的采用以去掉雜質。固定相的選擇硅膠、鍵合固定相(如C18)、離子交換樹脂、聚酰胺、氧化鋁、凝膠等都可以作為色譜柱的填料。 有不少文獻報道,對填料可以進行一下處理提高了分離效果,如,對硅膠進行的(或緩沖液)處理。
超載、邊緣切割、中心切割、放大技術與非線性效用
在制備色譜中,因為沒有必要達到分析色譜那樣的分離度,可以在一定范圍內大大加大進樣的濃度和體積。在做分離的時候,也有一些分析色譜的時候,不能用到的技巧。因為篇幅關系,不在這里敘述。
柱轉換技術
通過接頭或者閥門,實現柱子的簡單延長,或者比較方便地實現對其中一個(或幾個)組分的精制。