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              陜西低溫生物菌種廠家在線咨詢

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              發(fā)布時間:2020-11-12 06:36  

              低溫生物菌種的工藝介紹

              現有生化工藝有活性污泥法、生物接觸氧化、MBBR、MBR等,這些工藝在常溫下均可實現氨氮的有效去除并達標,這時好氧系統(tǒng)中占主導地位的是中溫(微生物)硝化菌,硝化菌分自養(yǎng)硝化細菌和異樣硝化菌。

              自養(yǎng)硝化菌生長繁殖緩慢,在活性污泥系統(tǒng)中無法與異養(yǎng)細菌競爭,難以維持較高的細胞濃度,需要保持較長的污泥停留時間來取得較好的脫氮效果,易受外界環(huán)境影響,對環(huán)境沖擊尤其是毒物沖擊非常敏感,硝化系統(tǒng)很容易崩潰,要經常不斷的馴化和培養(yǎng)。



                                                                              什么是低溫生物菌種的保藏?

              將需要保藏的菌種,接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,菌絲長滿斜面時,用硫酸紙包扎棉塞或者硅膠塞,放置在4℃的冰箱中保藏,叫做斜面(菌種)低溫保藏法。由于微生物的新陳代謝活動未停止,試管內培養(yǎng)基易失水變干。因此,保藏時間較短,不適于長期保藏。每隔3~6個月應轉管一次。草菇菌種不耐低溫,需保藏在10~12℃之間。或在草菇菌落上灌注3~4毫升的防凍劑(10%的甘油)。當菌絲長滿斜面后,在無菌條件下,用無菌橡皮塞代替棉塞,并用石蠟密封,即可在室溫或冰箱中保藏。這種方法可防止雜菌污染,隔絕氧氣,避免培養(yǎng)基干燥,使用方便。據測定,保藏3年的菌種生活力仍很旺盛。





                                                                    低溫生物菌種的技術規(guī)程

              1、安瓿管或凍存管的準備

              用圓底硼硅玻璃制品的安瓿管,或螺旋口的塑料凍存管。注意玻璃管不能有裂紋。將凍存管或安瓿管清洗干凈,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。
              2、 保護劑的準備
              保護劑種類要根據微生物類別選擇。配制保護劑時,應注意其濃度,一般采用10-20%甘油。
              3、 微生物保藏物的準備
              微生物不同的生理狀態(tài)對存活率有影響,一般使用靜止期或成熟期培養(yǎng)物。
              分裝時注意應在無菌條件下操作。
              菌種的準備可采用下列幾種方法:
              刮取培養(yǎng)物斜面上的孢子或菌體,與保護劑混勻后加入凍存管內;
              接種液體培養(yǎng)基,振蕩培養(yǎng)后取菌懸液與保護劑混合分裝于凍存管內;
              將培養(yǎng)物在平皿培養(yǎng),形成菌落后,用無菌打孔器從平板上切取一些大小均勻的小塊(直徑約5-10毫米),真菌取菌落邊緣的菌塊,與保護劑混勻后加入凍存管內;
              在小安瓿管中裝1.2-2毫升的瓊脂培養(yǎng)基,接種菌種,培養(yǎng)2-10天后,加入保護劑,待保藏。
              4、 預凍

              預凍時一般冷凍速度控制在以每分鐘下降1℃為好、使樣品凍結到-35℃。





                                                                         低溫生物菌種的控溫方法

              1.程序控溫降溫法,應用電子計算機程序控制降溫裝置,可以穩(wěn)定連續(xù)降溫,能很好地控制降溫速率。

              2.分段降溫法:將菌體在不同溫級的冰箱或液氮罐口分段降溫冷卻,或懸掛于冰的氣霧中逐漸降溫。一般采用二步控溫,將安瓿管或塑料小管,先放-20℃至-40℃冰箱中1-2小時,然后取出放入液氮罐中快速冷凍。這樣冷凍速率大約每分鐘下降1-1.5℃。 對耐低溫的微生物、可以直接放入氣相或液相氮中。
              3.保藏
              將安瓿管或塑料凍存管置于液氮罐中保藏。一般氣相中溫度為-150℃,液相中溫度為-196℃。保藏周期一般10年以上。
              4.復蘇方法

              從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。




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