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超大孔單分散聚合物層析介質(zhì)用于病毒分離純化

傳統(tǒng)生物層析介質(zhì)不能有效用于病毒分離純化很主要的原因是其孔徑太小，病毒不能擴散到傳統(tǒng)層析介質(zhì)的內(nèi)孔里，因此可及比表面積低，吸附載量低，而超大孔單分散層析介質(zhì)由于粒徑均勻，孔徑大（>400 納米）因此病毒可以有效的擴散到孔內(nèi)部空間，使得靜態(tài)吸附載量大幅度提升。超大孔結(jié)構(gòu)還可以有效降低病毒與填料表面配基之間多位點結(jié)合，避免亞基的解聚，使得病毒結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性得到大幅度的提高。另外超大孔聚合物層析介質(zhì)用于病毒及類病毒（疫l苗）分離純化的優(yōu)點是其分離模式與傳統(tǒng)生物制藥層析分離純化方法基本一樣，容易放大生產(chǎn)，重復(fù)性好。但超大孔層析介質(zhì)制備技術(shù)難度大，且其機械強度差，耐壓性差，容易破碎，導(dǎo)致篩板堵塞，壓力升高等缺點。雖然納微已經(jīng)可以制備孔徑大于高達800納米的超大孔徑聚合物微球，但要滿足病毒大規(guī)模分離純化，還需要進一步解決超大孔微球機械強度問題。

以下為納微超大孔徑DEAE離子交換層析介質(zhì)在流l感病毒（H5N2）純化中的數(shù)據(jù)，結(jié)果顯示超大孔介質(zhì)對流l感病毒的分離純化比傳統(tǒng)層析介質(zhì)具有明顯的優(yōu)勢。

1、常用的定量分析方法：標(biāo)準(zhǔn)曲線法、直接定量（外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法）

2、層析柱主要有：弗羅里硅土柱、氧化鋁柱、硅膠柱、活性碳柱、其他填料層析柱子

3、液相色譜的特點是：、高速、高靈敏度、高度自動化

4、氣相色譜儀常用的檢測器有：火焰離子化檢測器（FID）、火焰光度檢測器（FPD)

電子捕獲檢測器（ECD）、氮磷檢測器（NPD）、原子發(fā)射檢測器

5、檢測器的評價指標(biāo)：噪聲、漂移、靈敏度、線性范圍與動態(tài)范圍

6、氣相色譜柱有：填充柱、毛細(xì)管柱（開管型和填充型）

層析簡介

層析（chromatography）是“色層分析”的簡稱。利用各組分物理性質(zhì)的不同，將多組分混合物進行分離及測定的方法。有吸附層析、分配層析兩種。一般用于有機化合物、金屬離子、氨基酸等的分析。層析利用物質(zhì)在固定相與流動相之間不同的分配比例，達到分離目的的技術(shù)。層析對生物大分子如蛋白質(zhì)和核酸等復(fù)雜的有機物的混合物的分離分析有極高的分辨力。