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              發布時間:2020-11-06 10:22  


               在眾多的生物實驗室,分子生物學檢測方法如PCR因其高靈敏度、快速、操作方便等優勢已經被廣泛應用,不過正是由于它靈敏度極高,微量的污染源都有可能導致檢測結果的假陽性,所以對環境污染的控制也極為嚴格。面對眾多的污染源,比如樣本交叉污染、試劑儀器交叉污染、質粒污染、PCR擴增產物污染、還有極容易忽視的氣溶膠污染,氣溶膠是由固體或液體小質點分散并懸浮在氣體介質中形成的膠體分散體系,在空氣與液體面摩擦時,比如在操作時比較劇烈地搖動反應管,開蓋時、吸樣時及污染進樣槍的反復吸樣都可形成氣溶膠而污染。據計算一個氣溶膠顆粒可含48000拷貝,因而由其造成的污染是一個非常重要而被忽視的污染源。







               實驗室耗材作為實驗猿管理實驗室必備的用具,實驗室管理員統一管理實驗室耗材、試劑,應詳細記錄實驗室所領取的各項耗材、試劑。各負責人按照負責的實驗種類領取相應的耗材、試劑。不同實驗室耗材管理的方法各有不同,聽聽實驗猿怎么說!



               雖然這些污染對PCR實驗結果的影響已經受到了廣泛重視,多數實驗室對污染控制都采取了各種辦法,比如定期大掃除清理、劃分操作區域、試劑分裝、操作謹慎、重復實驗、多角度驗證結果。但是微量的核酸片段就能被擴增,所以對污染物的控制不僅僅是做到這些就能夠杜絕和避免的,關鍵是需要從源頭控制。目前多數生物試驗室,分子實驗每天都在大規模進行,污染源已經無處不在,特異性的,非特異性的,同源的,非同源的,廣泛分布在樣本容器、實驗室臺面,試劑溶液中、儀器表面內管附著等等,你以為普通的清理就能解決這些污染源嗎?必須是不行的,實驗室大拿們都為了清除這些污染源研究出好多種方法,整理跟大家共享。






               當然每個省份在PCR實驗室技術評審時所要求的重點都有所差異,有些省份比較重視質量控制,有些省份比較重視結果的發放及抱怨處理,有些則熱衷于檢查儀器及試劑的資質。分析我國大PCR實驗室的檢測項目不難發現,近80%的實驗室采用熒光PCR試劑盒進行臨床檢測,即這部分實驗室不存在開放性核酸鑒定環節,試劑工作液的配制多在核酸制備完成后進行,依存“試劑配置與PCR擴增之間的時間越短越好”的原則,多數實驗室的試劑配制均在核酸制備室完成,也就是說,試劑配制室的存在基本被忽視,了解了羅氏COBAS的操作方式,這種做法便顯得無可厚非!核酸制備完成并加入PCR反應液后,移管到擴增室,由于采用封閉核酸鑒定的方法,這樣擴增室的設置也同樣顯得多余!






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