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              發(fā)布時(shí)間:2021-07-24 13:56  






              等溫核酸試劑盒

              RPA的原理;

              重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成,對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中,由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過(guò)程進(jìn)行得非常快,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。



              重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)(RPA)是2006年由英國(guó)科學(xué)家研發(fā)的一種核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。它是利用多種酶參與,在體外模擬生物體內(nèi)DNA復(fù)印,恒溫條件下短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)靶基因大量擴(kuò)增,既可以擴(kuò)增DNA,也可以擴(kuò)增RNA。RPA技術(shù)具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強(qiáng)和操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),是目前很有望替代PCR技術(shù)的核酸等溫?cái)U(kuò)增方法,在基層現(xiàn)場(chǎng)診斷中,具有廣闊的應(yīng)用前景。

              相對(duì)來(lái)說(shuō)RPA是很好的恒溫?cái)U(kuò)增法,可在較低溫下恒溫?cái)U(kuò)增,不需要復(fù)雜儀器設(shè)備,操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)時(shí)間短,特異性好、靈敏度高,可采用電泳、熒光、側(cè)向流試紙等多種方式檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物




              核酸試劑盒

              英國(guó)TwistDx 公司(前身為ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英國(guó)劍橋Babraham研究院建立的生物技術(shù)公司。該公司通過(guò)突破等溫DNA擴(kuò)增,開(kāi)發(fā)的重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)(RPA),被譽(yù)為DNA診斷領(lǐng)域的革命性創(chuàng)新。

              RPA技術(shù)主要依賴(lài)于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈 DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應(yīng)溫度在37°C左右。



              側(cè)向流分析(LFIA)具有成本低、響應(yīng)快、易于使用和高通量等優(yōu)點(diǎn)。但LFIA與其他分析方法相比靈敏度較低,限制了其在不同領(lǐng)域的實(shí)際應(yīng)用。進(jìn)而迫切需要一種新的標(biāo)記分子,不僅易于合成,而且在信號(hào)產(chǎn)生和放大方面具有的物理/化學(xué)性質(zhì)。普魯士藍(lán)納米粒子(PBNP)具有良好的生物相容性和其它的性質(zhì),如低成本、高表面體積比、易于合成和表面改性等,一直受到生物醫(yī)學(xué)研究者的廣泛關(guān)注。




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