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發布時間:2021-06-23 05:12  





熒光分光光度計種類
熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強、用樣量少、方法簡便、工作曲線線形范圍寬等優點,可以廣泛應用于生命科學、醫學、藥學和藥理學、有機和無機化學等領域。熒光分光光度計的發展經歷了手控式熒光分光光度計,自動記錄式熒光分光光度計,計算機控制式熒光分光光度計三個階段;熒光分光光度計還可分為單光束式熒光分光光度計和雙光束式熒光分光光度計兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計,配有壽命和相分辨測定的熒光分光光度計等。
熒光光譜特點
靈敏度更高 g/ml,應用不如UV廣泛。應用:①直接熒光光度法②作為HPLC的檢測器(用的多)根據物質分子吸收光譜和熒光光譜能級躍遷機理,具有吸收光子能力的物質在特定波長光(如紫外光)照射下可在瞬間發射出比激發光波長長的光,即熒光。 分子受特定光照射后處于激發態的 分子返回基態時發出熒光, 其熒光強度與 呈線性關系, 從而可測出氣體濃度。當檢測儀器系統確定后,熒光總光強I與 濃度的之間的關系可表示為:I=KC在穩定的條件下,這些參數也隨之確定,k可視為常數。因此,式中I=kC表示的紫外熒光光強I與樣氣的濃度C成線性關系。這是紫外熒光法進行定量檢測的重要依據。
熒光光譜體系間跨越
是處于激發態分子的電子發生自旋反轉而使分子的多重性發生變化的過程。分子由激發單重態跨越到激發三重態后,熒光強度減弱甚至熄滅。含有重原子如碘、等的分子時,體系間跨越為常見,原因是在髙原子序數的原子中,電子的自旋與軌道運動之間的相互作用較大,有利于電子自旋反轉的發生。另外,在溶液中存在氧分子等順磁性物質也容易發生體系間跨越,從而使熒光減弱。
熒光光譜
熒光分析法的特點是靈敏度高,對某些物質的微量分析可以檢測到 克數量級,如污水中的銀含量用熒光分析法可以檢測到 克,可以檢測到 克。對一些亦可檢測到 克。熒光分析的靈敏度比分光光度法的靈敏度高2~3個數量級,這是由于熒光分析的熒光和入射光之間成直角,而不在一條直線上,所以是在黑背景下檢測熒光。而分光光度法的與入射光在一條直線上,所以它是在亮背景下檢測。因此熒光分析法比分光光譜法靈敏度高。分光光譜法的靈敏度一般只能檢測到 克,兩者相差三個數量級。當然熒光分析法比起帶電子顯微鏡的電子探針法靈敏度又低一些,然而電子探針儀器價格昂貴,使用不方便。