河南植物原位雜交服務服務介紹“本信息長期有效”

武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業從事生物醫學技術服務、技術咨詢及產品開發的生物技術服務企業。然后分別鋪篩選平板使細胞長成菌苔（lawn），再將兩種菌苔復印到同一個三重篩選平板上，原則上只有誘餌和靶蛋白發生了相互作用的二倍體細胞才能在此平板上生長。公司坐落于武漢光谷，由3位歸國博士領銜創辦。公司長期致力于建立并完善多項基礎生物技術服務平臺?，F憑借自身技術特色，依托光谷生物城技術產業優勢，面向全國提供的生物技術服務。

經過改造帶有HIS3報道基因的酵母細胞，只有當HIS3被啟動表達才能在缺乏組氨酸的選擇性培養基上生長。HIS3報道基因的轉錄表達是由“誘餌”和“獵物”的相互作用所啟動的。大多數雙雜交系統往往同時使用兩個甚至三個報道基因，其中之一是 LacZ。這些改造后的基因在啟動子區有相同的轉錄因子結合位點，因此可以被相同的轉錄因子（如上述的Gal4蛋白）。

武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業從事生物醫學技術服務、技術咨詢及產品開發的生物技術服務企業。公司長期致力于建立并完善多項基礎生物技術服務平臺。現憑借自身技術特色，依托光谷生物城技術產業優勢，面向全國提供的生物技術服務。

FISH：采用了已知序列的、特異性的單鏈核酸作為探針，標記了生物素或熒光素，在一定的溫度和離子濃度下通過堿基互補配對法則，使得DNA-DNA原位雜交，采用熒光法顯示，將DNA在細胞爬片、組織切片(石蠟切片or冰凍切片)的原始位置上標記出來的一種技術。對分散在若干個瓊脂平板上的少數菌落（100-200）進行篩選時，可采用該方法。

原位雜交在前。

（1）常規脫蠟入水。

（2）37℃蛋白酶K消化20min，37℃漂洗液充分洗去蛋白酶K。

（3）滴加探針，加蓋玻片，避光、濕盒、37℃過夜孵育。

（4）如果試劑盒允許的話，將試劑盒中洗脫液水浴加溫至37℃震蕩洗脫多余的探針。

（5）加堿性磷酸酶標記的抗1體，37℃孵育半小時，洗去抗1體后顯色。

免1疫組化在后。

（1）將顯色后確認為陽性的切片充分漂洗。

（2）在PH為6.0的枸櫞酸鈉溶液中，微波至96℃左右，作用10min。

（3）滴加一抗，37℃濕盒孵育2h。

（4）充分漂洗切片，滴加二抗，室溫下孵育40-50min。

（5）DAB顯色后，采用PBS中止顯色反應。

（6）不要復染核，不然就蓋住原位雜交信號了。