冷凍食品加工廠熒光定量PCR高性價比的選擇【勱博儀器】

廣州勱博儀器有限公司產品服務包括：非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統、病毒核酸提取系統、非洲病毒快速檢測試劑盒。廣州勱博--屠宰場熒光定量PCR擴增序列特異性檢測方法是在PCR反應中利用標記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來檢測產物，它又可分為直接法和間接法。我們的客戶對象是食品企業/公司/廠、食品加工企業/公司/廠、冷凍食品加工企業/公司/廠、養殖場、養豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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在real-time Q-PCR技術中，無論是相對定量還是標準曲線定量方法仍存在一些PCR定量方法均有的問題有待解決。在標準曲線定量中，標準品的制備是一個必不可少的過程。廣州勱博--冷凍食品加工企業/公司/廠核酸提取純化QF-PCR技術在國外已有較廣泛的應用，但目前尚未在國內產前診斷臨床中普遍開展。目前由于無一統一標準，各個實驗室所用的生成標準曲線的樣品各不相同，致使實驗結果缺乏可比性。此外，用real-time Q-PCR來研究mRNA時，受到不同RNA樣本存在不同的逆轉錄（RT）效率的限制。在相對定量中，其前提是假設內源控制物不受實驗條件的影響的，合理地選擇合適的不受實驗條件影響的內源控制物也是實驗結果可靠與否的關鍵。

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與傳統的PCR技術相比，Real-time Q-PCR的不足之處是：（1）由于運用了封閉的檢測，減少了擴增后電泳的檢測步驟，因此也就不能監測擴增產物的大小；（2）因為熒光素種類以及檢測光源的局限性，從而相對地限制了real-time Q-PCR的復合式（multiplex）檢測的應用能力；（3）目前real-time Q-PCR實驗成本比較高，從而也限制了其廣泛的應用。在real-timeQ-PCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的監測和連續地分析擴增相關的熒光信號，隨著反應時間的進行，監測到的熒光信號的變化可以繪制成一條曲線。

廣州勱博儀器有限公司產品服務包括：非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統、病毒核酸提取系統、非洲病毒快速檢測試劑盒。每經過一個循環，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。我們的客戶對象是食品企業/公司/廠、食品加工企業/公司/廠、冷凍食品加工企業/公司/廠、養殖場、養豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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非洲為何難以控制？非洲病毒基因組全長 170～190 kb，為有囊膜的雙鏈 DNA 病毒，病毒粒子大小為 175～215 nm，呈正二十面體結構，也是唯i一的蟲媒DNA病毒。或者根據實際情況，在生豬進場前以生豬運輸車輛為單位采集全部生豬血液樣品，混合后進行檢測。非洲病毒是一種急性、熱性、高度接觸性傳i染病，引起豬的死i亡率可達100％，并且非洲具有潛伏期，即使感i染病毒，但沒有臨床癥狀，就有可能通過非實驗室檢驗技術關卡流入市場，進而導致下游食品企業相關問題的出現。

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非洲與傳統相似且綜合癥狀復雜難辨，臨床上類似于急性，表現為高熱、皮膚充血、流i產、水腫和臟器出血。我國因之前不屬于非洲i疫情國家，因此沒有相關的針對性研究，目前采用的是原農i業部檢疫所于1997年與美國梅島動物病研究所共同研究的檢測方法，主要是PCR和ELISA，標準遵循GB/T 18648-2002非洲診斷技術。研究表明熱工過程可以殺滅病毒（如流行性腹瀉病毒），但這只能作為緊急緩解措施，因為這要求產品在干燥和運輸過程中必須不存在交叉污染。隨著相關檢測技術的發展，對于非洲的檢測方法也更加完善。PCR技術是目前i簡單、快速的分子學檢測方法，但該方法的敏感性有限，因此以PCR為基礎的更新方法應運而生。

廣州勱博儀器有限公司產品服務包括：非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統、病毒核酸提取系統、非洲病毒快速檢測試劑盒。在傳統的PCR中，常用凝膠電泳分離并用熒光染色來檢測PCR反應的最終擴增產物，因此用此終點法對PCR產物定量存在不可靠之處。我們的客戶對象是食品企業/公司/廠、食品加工企業/公司/廠、冷凍食品加工企業/公司/廠、養殖場、養豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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隨著定量PCR儀設計上的不斷改進，對溫度控制的精密性越來越高，出現了像Rotor-Gene這樣的管間溫度均一性達±0.01℃的定量PCR儀，而該公司新近推出的Rotor-Gene6000更可達到±0.02℃的溫度分辨率。溫度上的高分辨率使得運用定量PCR儀進行高分辨率熔解曲線（HRM）分析基因型成為可能。專門的熱循環儀配備熒光檢測模塊，用于監測擴增時的熒光，檢測到的熒光信號反映了每個循環擴增產物的量。高分辨率熔解曲線根據序列長度、GC含量和互補性分析樣品。不同的核酸序列，哪怕僅有一個堿基的差異，也會體現在熔解溫度的差別上。

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PCR是1985年開始出現的一項基因檢測技術,由于PCR技術具有簡便易行、靈敏度高等優點,該技術被廣泛應用于基礎研究,成為分子生物學必不可少的研究工具。但在許多情況下,研究者們已不再滿足于得知某一特異DNA序列的存在與否,他們更著眼于對其進行精i確的核酸定量。根據應對流行性腹瀉病毒的經驗，在不影響動物性能和飼料成本的情況下，替換原料的可行性使得很多生產者不再使用豬源原料。因而,借助PCR對基因快速、敏感、特異而準確的定量成為目前分子生物學技術研究的熱點之一。實時熒光定量PCR( real-time quantitative PCR, RQ PCR)技術實現了PCR從定性到定量的飛躍,它以其特異性強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快、全封閉反應等優點成為分子生物學研究中的重要工具。