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發布時間:2021-09-18 10:08  





等溫核酸試劑盒
TwistAmp Basic試劑盒:
可實現DNA擴增。包含DNA擴增所需的所有酶和試劑,用戶只需提供引物和模板;新貨號產品通過單鏈結合蛋白SSB和dNTP原料進行優化,提高靈敏性,增強RPA反應效能。使用TwistAmp Basic時,即使PCR引物也有效。TwistAmp Basic已被用于固相、加尾引物、配基、電化學和微陣列等應用。
非常適用于:終點凝膠電泳 DNA檢測、下游應用。
核酸試劑盒
恒溫擴增技術
取代PCR的核酸擴增術﹐
領域:廣泛應用于臨床診斷,食品安全檢測,動物疾病檢測等領域特點:快速,特異,無需專門設備
類型:1.滾環核酸擴增( rolling circle amolification,RCA)
2.環介導等溫擴增( loop-mediated isothermal amplification,LAMP)3.鏈替代擴增( strand displacement amplification)
4.依賴核酸序列擴增( nucleicacid sequence based amplification ,NASBA)
5.解鏈酶擴增( helix dependent amplification,HAD)
RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應溫度在37°C左右。
重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發生鏈交換反應形成并啟動DNA合成,對模板上的目標區域進行指數式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非常快,一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物。RPA擴增的基礎體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴增所需的所有試劑,我們只要準備好引物和模板就行。擴增結果可以通過凝膠電泳進行終點檢測,產物純化后可用于下游研究。
在這個基礎體系中添入不同的酶和探針,就可以實現多樣化的RPA應用。舉例來說,TwistAmp? exo結合了exo探針技術和核酸外切酶III,能實現數據的實時讀取,就像熒光定量PCR一樣。不過反應終點的擴增子總量有所減少,適合獲得強熒光信號進行動力學分析,不適合終點檢測(比如跑膠)。將exo探針技術、核酸外切酶III和逆轉錄酶結合起來,可以一步實現RNA模板的實時擴增。
“強烈推薦CT影像作為目前新冠的診斷方法”,她表示,“病毒核酸檢測是確診新型冠狀病毒無創診斷的金標準,然而檢測結果‘CT陽性、核酸陰性’的結果,可能影響臨床排查。目前新型冠狀病毒核酸檢測特異性高、敏感性偏低,不排除存在部分假陰性。”
在現實中,也出現了核酸試劑盒檢測數次陰性,卻確診為新冠的案例。