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核酸試劑盒

樣本采集質控重要性

樣本采集作為核酸檢測的首步，其中涉及的采樣耗材和病毒保存液的質量保證對檢測結果的準確性至關重要，不合格樣本會直接影響檢驗結果。在新冠核酸檢測中，不合格樣本通常是由于采樣問題和采樣用具問題導致的。

合格的病毒保存液目前主要要求兩點：

1.保證病毒的充分滅活，防止采樣、運輸和檢測過程的風險。

2.保證病毒核酸（RNA）在采集、運輸過程中的穩定性，保證檢測結果的準確性，防止樣本運輸保存過程中降解導致檢測的“假陰性”。

英國TwistDx 公司（前身為ASM科技有限公司）成立于1999年，基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術公司。該公司通過突破等溫DNA擴增，開發的重組酶聚合酶擴增技術(RPA),被譽為DNA診斷領域的革命性創新。

RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈 DNA結合蛋白(SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應溫度在37°C左右。

RPA技術主要依賴于三種酶：能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應溫度在37°C左右。

重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發生鏈交換反應形成并啟動DNA合成，對模板上的目標區域進行指數式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合，防止進一步替換。在這個體系中，由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非常快，一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物。RPA擴增的基礎體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴增所需的所有試劑，我們只要準備好引物和模板就行。擴增結果可以通過凝膠電泳進行終點檢測，產物純化后可用于下游研究。

在這個基礎體系中添入不同的酶和探針，就可以實現多樣化的RPA應用。舉例來說，TwistAmp? exo結合了exo探針技術和核酸外切酶III，能實現數據的實時讀取，就像熒光定量PCR一樣。不過反應終點的擴增子總量有所減少，適合獲得強熒光信號進行動力學分析，不適合終點檢測(比如跑膠)。將exo探針技術、核酸外切酶III和逆轉錄酶結合起來，可以一步實現RNA模板的實時擴增。