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等溫核酸試劑盒

FAQ

能否進行熒光終點分析?

可以。這樣比較的是反應開始時的熒光和反應結束時的熒光，熒光增強意味著發生了擴增。

4能否支持生物素或熒光標記的寡核苷酸?

支持。在RPA反應中，連有生物素或熒光團的引物與未修飾的引物表現差不多。據悉還沒有發現任何差異。

5跑膠前需要回收RPA產物嗎?

需要。RPA反應中的物質會干擾瓊脂糖電泳，如果不進行產物回收，跑出來的帶會出現拖尾。

核酸試劑盒

英國TwistDx 公司（前身為ASM科技有限公司）成立于1999年，基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術公司。該公司通過突破等溫DNA擴增，開發的重組酶聚合酶擴增技術(RPA),被譽為DNA診斷領域的革命性創新。

RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈 DNA結合蛋白(SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應溫度在37°C左右。

試劑盒

英國TwistDx Inc公司開發的重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)--被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術，目前全球新的等溫擴增檢測技術。以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產品，能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術對硬件設備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫、食品安全、生物防御和農業等領域。常規PCR必須經過變性、退火、延伸三個步驟，而PCR儀本質上就是一個控制溫度升降的設備。RPA反應的適宜溫度在37°C - 42°C之間，無需變性，在常溫下即可進行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外，由于不需要溫控設備，RPA可以真正實現便攜式的快速核酸檢測。據介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠將痕量的核酸(尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產物。而且RPA還用不著復雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產物進行終點檢測，還可以對擴增過程進行實時監控，甚至可以通過試紙條(側流層析試紙條LFD)讀取結果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴增子長度在500bp以內。不過，經過特別優化的RPA擴增，也可以生成更長的擴增產物，或者減慢擴增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進行反應。