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發布時間：2021-08-16 15:41

低溫生物菌種——菌種分離方法介紹

孢子分離又可分為以下幾種方法：

( 1 ）褶上涂抹法：選取新鮮、健壯、未開傘、未裂破的子實體，洗凈后用75 %酒精表面滅菌2 分鐘，然后連同培養基一起放入接種箱內，經熏蒸消毒12 ～ 24 小時，再按無菌操作技術將接種環在子實體菌褶上涂抹，把涂抹后帶孢子的接種環在培養基上劃線接種，，后置于25 ～ 28 ℃恒溫箱內培養，可得純菌種。

( 2 ）孢子印采集法：取滅過菌的載玻片、試紙或黑布，置于新鮮、未開傘或未開裂的子體菌褶的下方。經24 小時后，便落下孢子，形成印痕（即孢子印）。然后，用接種環或玻璃棒蘸取孢子，接種在平面或斜面培養基上，進行恒溫培養，可得純菌種。

( 3 ）孢子收集器采集法：孢子收集器由玻璃鐘罩、培養皿、三角架、搪瓷盤等組成。鐘罩下為一搪瓷盤，直徑25 厘米左右，盤內先墊襯4～6 層紗布，中央放1 副9 厘米直徑的培養皿，大蓋口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培養皿上放1 只鉛絲繞成的三角架，再將帶孔的玻璃鐘罩蓋上，頂上罩孔用棉塞塞好，用紗布包好整個孢子收集器，置于高壓滅菌鍋或蒸籠內滅菌2小時。

孢子收集器滅菌消毒后，放入無菌室或無菌箱內。然后，用小刀割取1 塊4～5 厘米大小的子實體，插在收集器內的三角架頂上（若無孢子收集器，也可用培養皿代替）。再置于溫度24 ～26 ℃下培養24 小時，培養皿中便可見到白色粉狀物，此即為孢子。此時，可將孢子收集器再移至接種箱內，取出培養皿，蓋好，并在培養皿內加入10 ～ 20 毫升的無菌水，使孢子散于本中，成為孢子懸浮液。然后，再用無菌打針筒或吸管吸取孢子懸浮液，接種于試管斜面培養基上，每管注2 ～ 3 滴。置于24 ～ 26 ℃溫度下培養5 ～ 7 天，培養基上便可長出白色菌落。待菌落直徑有0 . 5 厘米時，選健壯的菌落，再移接于另一試管的斜面培養基上培養。當白色菌絲長滿試管時，便得純菌種。

低溫生物菌種——菌種分離方法

寄主分離法即從生長有某種真菌的寄主體上（如茯苓、木耳木段）取下木片，進行分離的方法。如木耳制種時，可選朵大、出耳多、質厚的耳棒（即長有木耳的木段）。采集后，削去耳根下的樹皮，將其橫斷面鋸成1 厘米厚的木片，在無菌條件下，切去無耳菌絲部分，留下有耳菌絲部分，浸入水中1 分鐘，取出再用無菌水沖去木片上的液體。然后，用解剖刀將木片切成0 . 5 厘米的小塊，放入斜面培養基內，置24 ～26 ℃下培養，及時淘汰雜菌，選取純菌絲進行移植培養，即得菌種。

低溫生物產品特性

自古以來生物的產品具有高選擇性、高轉化率和高轉化速度的特性，可以在常溫、低壓或中壓的發酵條件下進行生產。該產品還具有以下特點：

1、易工程化：采用通用性強的發酵工藝和設備，適應規模化生產；

2、高度靈活：代謝對H?/CO/CO?沒有比例要求；

3、條件溫和：常溫、低壓或中壓等溫和條件下操作；

4、耐受性高：抗雜菌、對硫化物等常規雜質具有較強耐受性；

5、高經濟性：生產項目建設投資低，1-2年可收回建設投資，投資回報率高；

6、綠色生產：利用H?、CO和CO?氣體，固定二氧化碳, 節能減排降污染，能耗低，低水耗，環境友好。