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              試劑盒測定來電咨詢 蘇州夢犀生物

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              發布時間:2021-08-03 20:26  






              測定技術的基礎在于抗原之間的特異結合反應,所以任何的離不開的原料,如抗原,酶等。以前用于測定的抗原通常為各種純化抗原,而則為純化抗原動物后獲得的多和使用雜交瘤技術得到的單,而抗原或的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或及其酶結合物等測定試劑幾成為現實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現。



              器材(1) 聚塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。(2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。試驗原理試劑盒是固相夾心法酶聯吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。



              操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

              2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

              3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

              4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

              5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板)。

              6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

              7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。





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