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              Diol固相萃取柱規格給您好的建議【碩譜生物】

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              發布時間:2021-01-07 05:57  






              廣州碩譜生物科技有限公司Diol固相萃取柱規格

              為什么反相填料C18使用時建議溶液的PH范圍是2-8?

              C18填料是十八烷1基硅1烷鍵合硅膠,pH值超出酸性范圍時,鍵合相十八烷1基易發生水解而流失;當流動相pH超出堿性范圍時,會加速硅膠的溶解。這兩種反應均是不可逆的反應,會影響填料的性能。

              當我們極端pH條件下需要使用反相填料時,建議使用聚合物基質的反相填料,如HLB,PSD等,聚合物基質的填料pH耐受范圍是1-14,適用范圍非常廣哦。

              SPE小柱的使用過程

              下面我們設定填料為保留目標化合物,分析過程如下:

              1、預洗活化——除去柱子內的雜質,飽和平衡柱。依次用強溶劑、弱溶劑(緩沖溶液)進行活化。

              2、上樣——將樣品(包括分離物和干擾物)用一定的溶劑溶解,轉移入柱并使組分通過吸附劑,吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物。

              3、淋洗——用適當的溶劑淋洗吸附劑,使先前保留的干擾物選擇性的淋洗掉,分離物富集保留在吸附劑上。

              4、洗脫——用小體積的溶劑將被測物質從吸附劑上洗脫下來并收集。





              固相萃取技術的復雜、難搞也是人所共知,下面列舉了一些固相萃取操作中的常見的問題及解決辦法,希望能對你的固相萃取操作有所幫助。

              以下是固相萃取操作中常見的問題:

              一、回收率低;

              二、萃取重現性差;

              三、凈化效果不理想;

              四、SPE柱流速過低。

              正相作用機理:

              常見的極性固定相萃取材料包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土及含有qing基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2OH)的鍵合硅膠。

              正相固相萃取模式下,溶劑體系的極性應按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高,它們的洗脫強度也逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標化合物洗脫,選擇的淋洗液應在不洗脫目標化合物的前提下zui大限度地洗脫干擾物,所以洗脫液應能恰好完全洗脫目標化合物。正相模式下,溶劑體系的極性應按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高,它們的洗脫強度也逐漸增大。




              色譜柱保存

              反相色譜柱,保存溶劑通常是含至少30% 有機相的水溶液,也可在常規清洗后直接保存在有機相中。

              如果需要長時間儲藏,則需要使用較高比例的有機相(有機相比例至少大于50%)

              固相萃取知識

              要有效地利用離子交換機理將目標化合物吸附在SPE柱上,必須滿足以下兩個條件:

              (1)目標化合物離子與吸附劑官能團的離子態帶相反電荷;

              (2)萃取環境的pH必須同時使目標化合物和吸附劑上的官能團帶電荷;

              (3)萃取環境不能含有高濃度的帶有和目標化合物相同電荷的競爭化合物。

              在實際操作中,為了滿足前兩個條件,確保99%以上的目標化合物及固相萃取吸附劑上的官能團能夠呈離子態或呈中性狀態,應該根據目標化合物及固相萃取吸附劑官能團的pKa來調節樣品或SPE柱的pH。




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