您好,歡迎來到易龍商務網!
【廣告】
發布時間:2020-07-25 20:49  







武漢遠大弘元股份有限公司以氨基酸及其衍生物的研發、生產為基礎,以武漢大學生命科學學院和湖北省氨基酸工程技術研究中心的成果為依托,為客戶提供的產品。
天津工業生物技術研究所研究員劉君帶領的微生物生理和代謝工程研究組和研究員江會鋒帶領的新酶設計與酵母基因組工程研究組進行合作,通過結合代謝工程和蛋白質工程的方法,系統地改造大腸桿0菌,實現了OAH的合成。在研究中,首先比較了兩種不同來源的高絲氨酸乙酰轉移酶(MetX),然后通過敲除競爭和消耗途徑基因(meta,metB和thrB)并過表達合成途徑基因(thrA,metxlm),實現了OAH的積累,其產量達到1.68 g/L。為了進一步提高OAH的生產,該研究采用多種代謝工程策略對工程菌株進行進一步改造,包括:敲除賴氨酸競爭途徑基因lysA;利用啟動子工程調控ppc表達以增強草酰乙0酸的供給;比較不同來源的天冬氨酸激酶,促進前體天冬氨酸的合成等,使OAH的產量提高至4.69 g/L。L-半胱氨酸和胱氨酸是含硫的非必需氨基酸,它們是組成蛋白質的基本單元之一,廣泛用于、食品、化妝品的加工制造。然而,中間代謝產物高絲氨酸的大量積累說明其下游途徑關鍵酶MetXlm的催化能力是不足的。為了解決這一問題,該研究分別采用基于進化保守性和基于結構信息的蛋白質工程策略對MetXlm進行改造,獲得的突變體酶活比型提高了12.15倍并受到更少的反饋抑制。通過優化表達MetXlm突變體,使工程菌株OAH產量達到7.37 g/L。隨后該研究通過過表達胞內乙酰CoA合成途徑,調控胞內NADPH的合成,進一步提高OAH的合成能力。終獲得的工程菌株OAH-7在7.5 L發酵罐中經60 h發酵能夠生產62.7 g/L的OAH,是目前報道的0高水平。
近兩年,國內通貨膨脹以及日益嚴格的環保政策增加了L-半胱氨酸生產商的生產成本,L-半胱氨酸的價格也持續增長.
L-半胱氨酸可廣泛用于食品、藥品、化妝品等領域.2010年,全國共消費了將近1800噸L-半胱氨酸.其中,食品領域消費0大,占到總消費量的約35%.
基因工程技術已經廣泛應用于微生物的改良,它不僅擴大了改良的方向和范圍,而且使微生物的改造由未知的突變和誘變發展為有目的定點突變,它主要通過以下幾個途徑增強生產菌株的生產能力:
(1)利用多聚酶鏈反應(PCR)技術,改造目的基因,使基因產物的活力增加;5mg/LL-半胱氨酸,是目前報道的利用谷氨酸棒桿0菌生產L-半胱氨酸的最0高水平。(2)使用強啟動子或獨立啟動子增強目的基因的轉錄數;(3)把目的基因到更容易獲得產物的標準菌株或其它菌株中,例如,把目的基因轉入對底物的耐受性增強或者對產物的反饋抑制具有抗性的菌株;(4)有利于目的基因轉錄的基因或缺失抑制基因。