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發布時間:2020-10-06 20:19  





PCR實驗室注意事項——擴增產物分析區
本區是主要的擴增產物污染來源,因此必須注意避免通過本區的物品及工作服將擴增產物帶出。在使用PCR-ELISA方法檢測擴增產物時,必須使用洗板,廢液必須收集至1 mol/L HCl中,并且不能在實驗室內傾倒,而應當至遠離PCR實驗室的地方棄掉。
PCR實驗室裝飾
實驗室圍護結構應牢固、氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過渡;墻體內壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環氧樹脂自流坪,材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
PCR實驗室通風系統及壓力控制
各區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。
PCR實驗室注意事項
試劑準備區、樣品制備區設緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求,可以根據用戶的使用情況和資金的投入選擇。
PCR實驗室布局
實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區流向擴增后區,即從試劑準備區→樣品制備區→擴增區→擴增產物分析區,不得逆向流動。
核酸擴增后產物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法、質譜分析等。
PCR實驗室注意事項
幾個區域的大小設置情況,試劑準備區、擴增區、擴增產物分析區,空間可以相對小一些,樣品制備區要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應大一些。
PCR實驗室工作基本原則
不同的工作區域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開各工作區域時,不得將工作服帶出。
實驗室的清潔應當按試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區的方向進行。不同的實驗區域應當有其各自的清潔用具以防止交叉污染。
PCR實驗室各區功能及主要設備
擴增產物分析區:擴增產物的測定。本區主要設備加樣器和水浴箱等。本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。