食品公司熒光定量PCR多重優(yōu)惠

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QF-PCR技術在國外已有較廣泛的應用，但目前尚未在國內產前診斷臨床中普遍開展。此外，用real-timeQ-PCR來研究mRNA時，受到不同RNA樣本存在不同的逆轉錄（RT）效率的限制。為規(guī)范使用QF-PCR技術，由國家衛(wèi)生和計劃生育委i員會召集、中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)院產前診斷中心主辦的"全國產前篩查與診斷技術管理規(guī)范編制研討會"于2015年11月14日在成都召開，會議就QF-PCR等快速產前診斷技術的臨床應用進展及其在國內應用中存在的具體問題進行了深入而廣泛的探討，并形成了QF-PCR技術在產前診斷中的應用專家共識。

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熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。因為八聯(lián)管你需要蓋上蓋子，而且蓋子比較的難按下去，稍不慎就把八聯(lián)管弄斷或者液體撒出來。其原理： 隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測 產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。 

廣州勱博儀器有限公司產品服務包括：非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測試劑盒。實時熒光定量PCR技術于1996年由美國AppliedBiosystems公司推出，由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋， 無法判斷產物量的變化。在real-time技術的發(fā)展過程中，兩個重要的發(fā)現起著關鍵的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發(fā)現，它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測PCR產物成為可能。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段， PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值.

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什么是熒光定量PCR？常規(guī)PCR中，擴增產物（擴增子）是通過終點法來分析檢測，即PCR反應結束后，DNA通過瓊脂糖凝膠電泳，然后進行成像分析。而熒光定量PCR可以在反應進行過程中進行累積擴增產物的分析和檢測，即“實時”。②操作簡單、用時短，整個提取流程只有四步，大多可以在36-40分鐘內完成。在反應體系中加入熒光分子，通過熒光信號的按比例增加來反應DNA量的增加，使PCR產物的實時檢測成為可能。滿足實驗目的的熒光化學物質包括DNA結合染料和熒光標記的序列特異引物或探針；專門的熱循環(huán)儀配備熒光檢測模塊，用于監(jiān)測擴增時的熒光，檢測到的熒光信號反映了每個循環(huán)擴增產物的量。

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非洲為何難以控制？非洲病毒基因組全長 170～190 kb，為有囊膜的雙鏈 DNA 病毒，病毒粒子大小為 175～215 nm，呈正二十面體結構，也是唯i一的蟲媒DNA病毒。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。非洲病毒是一種急性、熱性、高度接觸性傳i染病，引起豬的死i亡率可達100％，并且非洲具有潛伏期，即使感i染病毒，但沒有臨床癥狀，就有可能通過非實驗室檢驗技術關卡流入市場，進而導致下游食品企業(yè)相關問題的出現。

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非洲與傳統(tǒng)相似且綜合癥狀復雜難辨，臨床上類似于急性，表現為高熱、皮膚充血、流i產、水腫和臟器出血。我國因之前不屬于非洲i疫情國家，因此沒有相關的針對性研究，目前采用的是原農i業(yè)部檢疫所于1997年與美國梅島動物病研究所共同研究的檢測方法，主要是PCR和ELISA，標準遵循GB/T 18648-2002非洲診斷技術。③安全無毒，不使用傳統(tǒng)方法中的氯i仿等有毒試劑，對實驗操作人員的傷害減少到最少，完全符合現代環(huán)保理念。隨著相關檢測技術的發(fā)展，對于非洲的檢測方法也更加完善。PCR技術是目前i簡單、快速的分子學檢測方法，但該方法的敏感性有限，因此以PCR為基礎的更新方法應運而生。

廣州勱博儀器有限公司產品服務包括：非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測試劑盒。實時熒光定量PCR(real-timequantitativePCR,RQPCR)技術實現了PCR從定性到定量的飛躍,它以其特異性強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快、全封閉反應等優(yōu)點成為分子生物學研究中的重要工具。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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一般豬場而言，只需配備非洲快速檢測試紙條，根據豬場規(guī)模配備10-50條即可，場里有異常波動，就可以及時現場檢測。一定注意取樣方法及注意事項，注意消毒。根據應對流行性腹瀉病毒的經驗，在不影響動物性能和飼料成本的情況下，替換原料的可行性使得很多生產者不再使用豬源原料。如果不幸檢測到疑是非洲陽性的樣本，建議再反復多卡檢測看看，基本上可以做到百i分百準確率。要是不放心，再送檢相關部分去做PCR檢測。豬場一線需要快速檢測技術以盡早確診，做到早處理、早隔離，但要明確的是，豬場只需要通過合適的檢測工具，幫助“定性”即可，不需要深入定量分析，有問題直接捕殺無害化處理。

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磁珠法核酸提取，具有傳統(tǒng)DNA提取方法無法比擬的優(yōu)勢，主要體現在：①能夠實現自動化、大批量操作，符合生物學高通量的操作要求，使得傳i染性疾病爆發(fā)時能夠進行快速及時的應對，這一特點使得傳統(tǒng)方法望塵莫及；廣州勱博--屠宰場熒光定量PCR擴增序列特異性檢測方法是在PCR反應中利用標記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來檢測產物，它又可分為直接法和間接法。②操作簡單、用時短，整個提取流程只有四步，大多可以在36-40分鐘內完成；③安全無毒，不使用傳統(tǒng)方法中的氯i仿等有毒試劑，對實驗操作人員的傷害減少到少，完全符合現代環(huán)保理念；④磁珠與核酸的特異性結合使得提取的核酸純度高、濃度大。