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制備型液相色譜分類

  制備型加壓液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，分為：

（1）低壓液相色譜；

（2）中壓液相色譜；

（3）高壓液相色譜；

（4）快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會存在一定交疊，沒有統(tǒng)一、明確的標準。

本設備適用于快速制備復雜的混合物并獲得高純度、高回收率的產物。

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制備型液相色譜簡介

色譜是根據(jù)混合物中各組分的化學特性對其進行分離的一種分離方法。制備型(Prep)色譜或純化色譜則是指利用色譜方法分離出一定量達到足夠純度的化合物用于后續(xù)實驗或處理的色譜方法。科學家首先要確定目標化合物，然后開發(fā)色譜方法，將目標化合物從原料、副反應或其它雜質中成功分離出來。其總體目標是滿足日益增長的高通量和高的效率需求，同時運用各種純化技術達到相應的規(guī)模、純度和重現(xiàn)性要求。

從大型制藥企業(yè)到小規(guī)模天然產物研究團隊，純化色譜在眾多科研機構中應用非常廣泛。盡管應用領域各不相同，用戶的一般要求卻非常相似，他們都希望分離出的終產物純度能達到95％或更高。

液相色譜的操作步驟

1).首先對流動相進行過濾，根據(jù)需要選擇不同的濾膜，一般為有機系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。

2).對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

3).正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機相沖凈為止)。

4).一般情況下，流動相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩(wěn)定，重要的是儀器基線走后，方可進樣測試。

5).同時進兩針標樣，將其結果相比較，其結果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進行樣品的測試了。

6).樣品測試結束后，就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機相進行保護，否則，有損色譜柱。

7).關機時，先關計算機，再關液相色譜。

8).填寫登記本，由負責人簽字。

那么如何選擇液相色譜儀？通過哪些指標來選擇呢？

下面給大家介紹幾條選擇液相色譜儀的方法僅供大家參考。液相色譜儀有輸液泵、自動進樣器、柱溫箱、檢測器、柱溫箱等。判斷液相色譜儀的指標有噪音，漂移，很小檢測濃度，定性定量重復性等。

1、液相色譜儀噪音是指由液相色譜儀的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其他液相色譜儀非溶質作用產生的高頻噪聲和基線的無規(guī)則波動。噪音的大小直接關系到液相色譜儀檢測器的檢測靈敏度，噪音越大，檢測的靈敏度就越低。

2、液相色譜儀檢測器很小檢測濃度(很小檢測限)是反映液相色譜儀檢測器靈敏度的重要參數(shù)。CL=2×Nd×C/H(CL：液相色譜儀很小檢測濃度Nd:噪音C：液相色譜儀樣品濃度很小檢測濃度H：樣品峰高)。

3、液相色譜儀檢測器漂移是指儀器穩(wěn)定后一段時間內基線漂離液相色譜儀基線原點的距離，通常用來衡量液相色譜儀穩(wěn)定快慢。高的品質的液相色譜儀能在較短的時間內達到穩(wěn)定，從而在一定程度上提高了液相色譜儀分析效率。

4、液相色譜儀定性定量重復性定性定量重復性主要是考核液相色譜儀穩(wěn)定性的指標，這對于分析液相色譜儀樣品來說是非常重要的。好的液相色譜儀其穩(wěn)定性應該是十分好的，這就要求多次液相色譜儀進樣保留時間及含量的一致性，這樣做出來的液相色譜儀檢測結果才能使人信服。