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發(fā)布時間：2021-04-22 04:22
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微球表面，即使帶有磺酸基和羧基等親水基團的微球表面，均可與生物分子，包括蛋白、短肽、和其它小分子，發(fā)生疏水（被動）吸附。
上述的物理吸附隨著蛋白分子量的增大而升高。聚苯乙烯微球表面大多數(shù)是C—C鍵、C—H鍵等疏水分子鏈形成的區(qū)域構(gòu)成的。這些區(qū)域可與生物分子的疏水區(qū)域形成物理吸附作用。蛋白與微球通過多點吸附的方式與這些區(qū)域相互作用，在混合蛋白溶液中，大分子蛋白會優(yōu)先吸附到微球表面。
在蛋白質(zhì)混合液的包被中，分子量大的蛋白，會優(yōu)先被吸附到微球表面。在佳的pH下，將微球和蛋白混合在一起，微球很容易對類似于這類物質(zhì)的進行特異性吸附，然后通過離心等方法，可將未交聯(lián)的蛋白除去。
表面功能化的微球可以和蛋白質(zhì)（或其它生物分子）發(fā)生共價偶聯(lián)，從而實現(xiàn)微球與蛋白質(zhì)（或其它生物分子）的共價結(jié)合。
羧基修飾微球經(jīng)過EDC/NHS活化之后，很容易與蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。值得注意的是，這些微球在高濃度的電解質(zhì)（高達1 M的一價鹽）中更加的穩(wěn)定。
粒子上的包被量，直接關(guān)系到包被結(jié)果及成本。如果包被量太低，則有可能不利于大程度上捕獲抗原；如果包被量太高，則有可能不利于節(jié)省成本，甚至可能過于“擁擠”而使部分失去活性。一般而言，我們建議每100 mg的微球，包被5~30 mg的蛋白不等。大微球比表面積小，包被蛋白的量較少；小微球比表面積大，包被蛋白的量較多。每個項目不一樣、每個廠家的來源有差異，具體的包被量，仍需按照實驗結(jié)果摸索。
