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PCR實驗室條件：

1、必須擁有標準的的PCR熒光實驗室;實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出由于該技術不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前已得到廣泛應用。本文試就其定量原理、方法及參照問題作一介紹

2、檢測設備必須符合標準PCR熒光實驗室設置要求;熒光定量PCR儀 實時熒光定量試劑 通用電腦 自動分析軟件，構成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統(tǒng)。

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PCR實驗室完備的實驗室配套設施

完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件，應根據(jù)各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應的設備和儀器，如超凈工作臺、離心機、加樣器等。

PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區(qū)域：試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染，進入各個工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。

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污染的預防與控制

PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染。常見的有以下幾種污染類型：擴增產(chǎn)物的污染；天然基因組DNA的污染；試劑的污染以及標本間的污染。要避免污染，首先應是預防，而不是排除。

標準的PCR實驗區(qū)

試劑準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)、各區(qū)配套的緩沖區(qū)及公共走廊。臨床基因擴增檢驗實驗室設計的核心問題是如何避免污染。

PCR實驗室應相對獨立，盡量避免與其他普通實驗套疊或者有通道上的交叉。之前看過一個圖，他們的PCR實驗室設置在檢驗科的里面，醫(yī)廢和標本的運送要穿過檢驗科的整個走廊，這種情況人、物流、污物均在同一個通道，感ran風險較高，應盡量避免。

PCR實驗室應設置以下區(qū)域：試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。這個4個區(qū)域在物理空間上必須完全獨立，各區(qū)域無論是空間上還是在使用中，應當始終處于完全的分割狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可以適當合并。每個區(qū)域間設置傳遞窗，要求一側(cè)打開時另一側(cè)無法打開。

4個區(qū)域應設置獨立的緩沖間，應設置可以通到四個操作區(qū)域的PCR走廊，在進入各區(qū)域前，應設置更衣間，每個區(qū)域的衣服可用不同顏色進行區(qū)分，在清潔區(qū)應設置洗澡間、衛(wèi)生間、值班室。還應考慮到醫(yī)廢和標本的運送通道。