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發(fā)布時間:2020-12-19 06:01  
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廣州碩譜生物科技有限公司丙磺酸SPE柱選擇
反相萃取吸附機理。
反相作用機理:
對于通過非極性作用力吸附在非極性SPE柱上的目標化合物,可以用具有非極性性質(zhì)的溶劑洗脫,如氯1仿、環(huán)1己烷、乙1酸乙酯等。只要溶劑的洗脫強度足以破壞目標化合物與吸附劑非極性官能團之間的范德華力,就可以順利地將目標化合物從SPE柱上洗脫下來。即便是極性較強的甲1醇,對于許多化合物來說也具有足夠的非極性作用力將其洗脫。有時單一溶劑不能把疏水性強的目標化合物完全洗脫下來,則可考慮使用二氯1甲1烷:乙1酸乙酯(1:1,體積比)。
色譜柱維護-反相柱
樣品
zui好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,zui好使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑(例如,流動相為水,樣品溶劑為甲1醇),為達到較好峰形,需要降低進樣量(以250x4.6mm規(guī)格為例,小于10μL)。
那么面對反相、正相固相萃取,在實際應(yīng)用中我們該選哪一個
鑒于大部分化合物都具有多種功能基團,在實際操作中,主要根據(jù)目標物和干擾物的性質(zhì)考慮采用何種萃取機理。例如:2-萘胺為弱堿性化合物(pKa=4.16),在一定 pH條件下可呈陽離子化狀態(tài),同時又具有疏水和親水基。此時可根據(jù)樣品基質(zhì)選擇有利于目標物與干擾物分離的萃取機理。在目標物處于極性較弱的樣品基質(zhì)中時,可利用極性相互作用,選擇正相萃取方式;而在極性樣品環(huán)境下,則可采用反相萃取方式。采用陽離子交換機制,可將萃取過程中 pH調(diào)至低于目標物 pKa的兩個 pH單位,即 pH=2.16。影響保留機制選擇的主要因素總結(jié)如下:
保留機制di一影響因素:目標物官能團的性質(zhì)
保留機制第二影響因素:樣品基質(zhì)的性質(zhì)
網(wǎng)上關(guān)于柱子是否能反沖一直有爭議,那是什么樣的柱子能反沖,什么不能。反沖之后,則為正者,或逆者。具體地說,每一種類型的柱子不只是 ODS柱,其他如正柱,氨基柱,離子交換柱等zui好解釋清楚。
答:一般正反相的柱子應(yīng)該都能反沖,只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子才不能反沖,不過目前這種柱子已經(jīng)比較少見了。反向沖刷是為了沖刷掉柱頭上的污物,反向沖刷后還是要正著使用,以免兩個柱頭被污染。我們一貫主張:前向使用,后向沖洗。