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低溫生物菌種——菌種分離方法介紹

孢子分離又可分為以下幾種方法：

( 1 ）褶上涂抹法：選取新鮮、健壯、未開傘、未裂破的子實體，洗凈后用75 %酒精表面滅菌2 分鐘，然后連同培養基一起放入接種箱內，經熏蒸消毒12 ～ 24 小時，再按無菌操作技術將接種環在子實體菌褶上涂抹，把涂抹后帶孢子的接種環在培養基上劃線接種，，后置于25 ～ 28 ℃恒溫箱內培養，可得純菌種。

( 2 ）孢子印采集法：取滅過菌的載玻片、試紙或黑布，置于新鮮、未開傘或未開裂的子體菌褶的下方。經24 小時后，便落下孢子，形成印痕（即孢子印）。然后，用接種環或玻璃棒蘸取孢子，接種在平面或斜面培養基上，進行恒溫培養，可得純菌種。

( 3 ）孢子收集器采集法：孢子收集器由玻璃鐘罩、培養皿、三角架、搪瓷盤等組成。鐘罩下為一搪瓷盤，直徑25 厘米左右，盤內先墊襯4～6 層紗布，中央放1 副9 厘米直徑的培養皿，大蓋口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培養皿上放1 只鉛絲繞成的三角架，再將帶孔的玻璃鐘罩蓋上，頂上罩孔用棉塞塞好，用紗布包好整個孢子收集器，置于高壓滅菌鍋或蒸籠內滅菌2小時。

孢子收集器滅菌消毒后，放入無菌室或無菌箱內。然后，用小刀割取1 塊4～5 厘米大小的子實體，插在收集器內的三角架頂上（若無孢子收集器，也可用培養皿代替）。再置于溫度24 ～26 ℃下培養24 小時，培養皿中便可見到白色粉狀物，此即為孢子。此時，可將孢子收集器再移至接種箱內，取出培養皿，蓋好，并在培養皿內加入10 ～ 20 毫升的無菌水，使孢子散于本中，成為孢子懸浮液。然后，再用無菌打針筒或吸管吸取孢子懸浮液，接種于試管斜面培養基上，每管注2 ～ 3 滴。置于24 ～ 26 ℃溫度下培養5 ～ 7 天，培養基上便可長出白色菌落。待菌落直徑有0 . 5 厘米時，選健壯的菌落，再移接于另一試管的斜面培養基上培養。當白色菌絲長滿試管時，便得純菌種。

低溫生物菌種——常用菌種介紹

固氮菌

固氮菌屬于細菌的一科。菌體桿狀、卵圓形或球形，無內生芽孢，革蘭氏染色陰性。好氧，厭氧，兼性厭氧均有，有機營養型，能固定空氣中的氮素。包括固氮菌屬、氮單孢菌屬、拜耶林克氏菌屬和德克斯氏菌屬。固氮菌肥料多由固氮菌屬的成員制成。氮是植物生長不可缺少的物質，是合成蛋白質的主要來源，固氮菌擅長從空中取氮，它們能把空氣中植物無法吸收的氮氣轉化成氮肥，源源不斷地供植物享用。自生固氮微生物是指在土壤中能夠利用的是土壤中的腐殖質獨立進行固氮的微生物，其中，多數是一類叫做自生固氮菌的細菌。經過兩三天的培養，成對的菌體呈“8”字形排列，并且外面有一層厚厚的莢膜。自生固氮菌中，人們應用得較多的是圓褐固氮菌(Azotobocter chroococcum）。圓褐固氮菌具有較強的固氮能力，并且能夠分泌生長素，促進植株的生長和果實的發育，因此，將圓褐固氮菌制成菌劑，施用到土壤中，可以提高農作物的產量。

地衣芽孢菌

提高作物抗病、抗寒、抗旱能力；增加土壤養分、改良土壤結構、提高化肥利用率；促使土壤中的有機質分解成腐殖質，刺激作物生長。促進作物生長、成熟、降低成本、增加產量、提高收入；有一定的固氮、解磷、解鉀作用。

生物菌種的特點

調節生命活動，增產增收：菌群中的膠凍樣芽孢菌、側孢芽孢菌、地衣芽孢菌等有益菌可促進作物根系生長，須根增多。有益微生物菌群代謝產生的植物內源酶和植物生長調節劑經由根系進入植物體內，促進葉片光合作用，調節營養元素往果實流動，膨果增產效果明顯。與施用化肥相比，在等價投入的情況下可增產15%—30%。