南陽NH2固相萃取柱類型服務為先「多圖」

廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國內生產SPE小柱較好的生產廠家。NH2固相萃取柱類型

反相模式下，溶劑體系的極性應以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減，并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會洗脫目標物，所選擇的淋洗劑應在不洗脫目標物的前提下，很大限1度地洗脫干擾物，所選洗脫劑應能碰巧完全洗脫目標物。

正相位模式是 SPE小柱相的固定相極性大于流動相極性的分離模式。主要用途：

固相萃取材料極性表面與物極性官能團極性相互作用；極性力比非極性力強，但比離子力弱；常用的極性基團有羥基，胺基，巰基等。弱極化基質環(huán)境有利于形成極性力，因為弱極化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團。結果表明： SPE正相萃取后，樣品基質多為弱極性，如正己烷、二1氯甲1烷、菜油等，而目標物多含有極性官能團。

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渠道效應

當 SPE小柱填料裝實后，流速過小柱時，液體是以層流通過填料層，將填料層充分浸潤，潤濕的液面截層向上推進，見附圖；流速過大時，柱床厚度過大，可能在填料內形成溝道，液流將穿過溝道，快速通過小柱，而使填料浸潤不足，從而使得體與填料的接觸面積大大減少，嚴重影響填料對目標物質的保留性。

溶液環(huán)境的 pH如何影響化合物在柱狀物上的保持性，我們?yōu)槭裁匆P注該化合物的 pKa值，這些因素需要放在C18柱狀物上嗎？

A：首先， Ka指酸度系數(shù)，也稱為酸離解常數(shù)，可以被理解為酸離解H離子的能力，而 pKa=- lgKa，對于酸，在環(huán)境中 pH離子的平衡如下

反相分離柱C18的適用范圍

C18反相分離柱廣泛應用于天然產物的提取，藥1物合成研究與開發(fā)，生物制藥等領域。若樣品極性偏大， Rf值非常接近，則不能分離正相模式；終產物要求純度98%以上，采用正相模式達不到；樣品在正相條件下存在溶解問題——不妨考慮采用反相C18模式分離。由于其填料粘合技術的成熟和良好的分離能力，C18柱已成為日常接觸分離提純研究人員zui多的反相柱。

反相式C18反相分離柱的主要參數(shù)

分離柱C18有多種參數(shù)，大致可分為四個方面：相鍵(包括修飾、封端)、填充載體(硅膠純度、填充顆粒類型、粒徑、孔徑)、柱體本身(柱效、柱內徑、柱長)和隱藏參數(shù)(比表面積、碳含量等)。小編想選擇以下幾個大家容易忽略的

反向作用機制：

反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團與目標化合物碳氫鍵之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質中提取分離出非極性和中等極性的目標化合物。

對利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標化合物，可用氯1仿、環(huán)己1烷、乙1酸乙1酯等具有非極性的溶劑洗脫。當溶劑的洗脫強度足夠大，可以使目標化合物與吸附劑非極性基團間的范德華力不受影響時，使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強的甲1醇，對許多化合物而言，也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候，單種溶劑無法完全洗脫疏水性的目標化合物，可以考慮使用二氯甲1烷：乙1酸乙1酯(1:1，體積比)。

在選擇C18反相分離柱時，應根據(jù)樣品情況，改變流動相的組成或溶劑強度，以提高分離度、選擇性或保留時間。

反相法C18在分離過程中，水可以與水-甲1醇、水-乙1腈、水-四氫呋1喃等多種有機溶1劑混合，而且分離效果也很好。適當?shù)母牧紕缛?胺或乙1酸，可抑制硅膠表面殘余硅羥基的酸性，從而減少對酸或堿性組分的保留，并減少拖尾；同時，對流動相 PH值的調節(jié)，可大大改變酸性或堿性組分的選擇性。對酸性組分，流動相 PH<7時，增加色譜柱的保留時間；對堿性樣品，流動相 PH≥7時，將堿性組分分為游離型(RNH2)，極性小，保留時間增大，可在固定相和流動相之間多次分布，提高堿性組分的選擇性。

回收率

當一個完整的 SPE操作過程中，目標化合物可能會出現(xiàn)在出液、淋洗、洗脫液或吸附劑中，當“目標物不能回收或回收率低”現(xiàn)象出現(xiàn)時，則向樣品溶液中加入標液，然后進行一個完整的 SPE操作，分別收集出液、淋洗液和洗脫液并進行分析。

先確定目標化合物存在于哪個部分，然后確定問題來自以下哪個環(huán)節(jié)：目標化合物不能保留在吸附劑中；沒有完全洗脫；其他環(huán)節(jié)。

目標化合物在吸附劑中保留度不足

在樣品流出液或淋洗液中發(fā)現(xiàn)5%以上的目標化合物時，可得出“不能保留目標化合物在吸附劑中”的結論。

2.目標化合物未完全洗脫

在樣本溶液流出液和淋洗液中沒有出現(xiàn)目標化合物，而在洗脫液中只出現(xiàn)少量或不出現(xiàn)目標化合物，則判斷為“目標物未完全洗脫”

廣州碩譜生物科技有限公司，反相SPE柱，是目前國內生產SPE小柱較好的生產廠家。NH2固相萃取柱類型

固相萃取柱的特點分為以下三類：

正相固相萃取法

固相型(填充型)：極性物質。

分離物：極性，中極性，非極性

移動相(洗脫劑)：無極性，中極性

吸附劑與化合物之間的作用力：氫鍵、π鍵、π鍵等。

常用于正相固相萃取柱的材料有：①極性基團結合硅膠；②極性吸附物

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固相萃取柱(英文，簡稱 SPE柱，或 Solid Phase extraction Cartridges，簡稱 SPE柱，簡稱 SPE柱)是一種從層析柱中提取、分離和濃縮樣品的前處理設備。

通常固相萃取柱大多采用聚丙1烯(PP)為材料的注射針筒裝置，其內部裝有兩片塞片，塞片是用聚乙烯(PE)或玻璃纖維制成的，塞片的中間裝有一定量的色譜吸附劑(填料)。固相萃取柱的上端開放，下端為出液口，液體通過吸附劑從出口流出。

采用液固萃取與柱液相色譜相結合的方法。固相色譜法是一種柱色譜分離方法，在分離機理、固定相和溶劑選擇等方面與 HLPC有很多相似之處。與 HLPC相比， SPE的填充粒徑(>40μ m)為3~10μ m。所以 SPE只能用來分離保留特性差異較大的化合物。