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凍存袋技術(shù)

是將細胞放在低溫環(huán)境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術(shù)。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。

凍存袋細胞復(fù)蘇操作步驟

1.操作人員應(yīng)戴防護面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。

2.自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易松掉。

3.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫，回溫后噴以70酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。

4.取出冷凍管，立即放入3℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，以7O%酒精擦拭保存管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。

5.取出解凍之細胞懸浮液，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例為1:10~1:15)，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。取0.1m1解凍細胞懸浮液作存活測試。

6.解凍后是否立即去除冷凍保護劑，依細胞種類而異，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護劑。惟若要立即去除，則將解凍之細胞懸浮液加入含有5-10m1培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心 1000rpm，5分鐘，移去上清液，加入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

凍存袋簡介

屬于醫(yī)院器械領(lǐng)域,涉及一種適合細胞回輸用的細胞凍存袋,即生物樣品存儲袋,包括:一存儲袋袋體和與其逐一并排排列的2~6個第二存儲袋袋體;一和第二存儲袋袋體之間,以及各個第二存儲袋袋體之間設(shè)置袋體間連接管路;一存儲袋袋體上沿設(shè)置一輸入口并通過該輸入口與連接管的一端連接,生物樣品經(jīng)由連接管并通過輸入口進入一存儲袋袋體;一存儲袋袋體上沿設(shè)置一取樣口,各個第二存儲袋袋體上沿設(shè)置第二取樣口,一取樣口和第二取樣口用于將存儲在袋體內(nèi)的生物樣品取出.本存儲袋能夠方便地用于對生物樣品例如臍帶血造血千細胞,血漿等處置,存儲,冷凍,復(fù)蘇以及直接給患者回輸生物樣品特別是造血細胞.

凍存細胞的裝置及方法

本發(fā)明的裝置由細胞凍存袋;細胞凍存盒,細胞架組成,細胞凍存袋置于細胞架上,細胞架置于細胞凍存盒內(nèi).批量凍存細胞的方法:將細胞懸液裝入細胞凍存袋中置于細胞架上,再將細胞架放入細胞凍存盒內(nèi);將細胞凍存盒投入液氮罐或-7O°C以下冷凍設(shè)備冷凍24小時,將細胞凍存袋取出投入液氮中或-70CI以下冷凍設(shè)備長期凍存,當需解凍細胞時,拉出細胞凍存袋放入38C-39C℃ 的溫水中解凍當凝固物都融化為液體后移入無菌操作臺,按無菌操作程序操作將細胞凍存袋中的細胞懸液分裝入離心管中離心,棄上清液,按常規(guī)解凍細胞來操作.本發(fā)明的細胞凍存袋凍存細胞體積達50-200ml,整套裝置直接投入液氮中或放入-70°C以下冷凍設(shè)備.