甘肅細胞培養實驗室常用指南「乾蕓儀器科技」

可用于多個領域，如研究、生物制藥加工；也可為細胞和組織培養工作提供解決方案：

1）可用于和胚體擴增及定向分化

2）可用于細胞和組織治1療的細胞制備

3）可用于細胞，為器1官移植做準備（例如hip stem, heart valve, graft）

4）可用于制備天然的生物制品（例如糖蛋白、病毒、病毒樣顆粒）觀察細胞應力下實時反映：使用Flexcell獨有的Flexcell StageFlexer Jr.顯微附屬設備，可在加力刺激的同時實時觀察細胞在三維狀態下牽拉刺激的反應多種基質蛋白包被的尼龍網錨可以加強細胞與網錨的結合

       RCCS?的原理和優勢，相比動態和靜態組織培養系統，RCCS的主要優勢是其能提供培養的環境，從而允許細胞聚集、三維生長和分化。這使得RCCS中的細胞培養環境非常接近于自然界生物體內環境。在大多數的動態培養系統中細胞、組織會受損，這主要是這些傳統的動態培養系統都會設計有用于驅動培養液運動的攪拌裝置，而這種安裝在培養液內部的攪拌裝置不可避免地會與細胞接觸從而破壞或影響細胞的生長環境，這與自然的生物體內環境是不符合的。

       細胞傳代的一般操作方法是在開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全，一般主要有細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養液(MEM-0.2%LH 培養液或MEM 培養液或199 等適合細胞有要求的培養液)、慶大溶液（1 萬單位）、7.5％NaHC03 溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS 洗液等。工具有小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1）、細胞吹打管（20 ml）(以上用具需經121℃至少15 分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱等；

       操作步驟一般是鏡檢細胞，挑選生長狀態良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態好無污染、無異常及可X疑病變細胞。配制細胞培養液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培養液100ml 內，加入滅活小牛血X清10m1，慶大溶液0.3m1，7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS 洗液沖洗細胞表面1-2 次，每次10m1，棄去洗液，向細胞瓶內加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1 細胞培養液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 細胞培養液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養量。加塞，置于37±1℃孵箱培養。約2～4 天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。

       以上方法僅供參考！