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ELISA試劑盒——會出現(xiàn)的問題及解決辦法

1. 加入反應(yīng)終止液后，沒有吸光值或吸光值偏低。

a.原因：未加入酶標記物。

解決辦法：請按照操作步驟進行。

b.原因：試劑盒內(nèi)容物未能充分回。

解決辦法：確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進行操作。

c.原因：室溫太低。

解決辦法：若室溫太低(<19℃)，請于操作步驟4，適當延長溫育時間。

d.原因：未使用試劑盒的清洗液清洗。

解決辦法： 請用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。

e.原因：試劑盒已過有效期限。

解決辦法：請更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。

Elisa試劑盒有哪些需要注意的？

1. 跟著病況的進展或由其他因素影響，某些在機體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動搖，因此有必要對標本進行預(yù)處理。間接法測定中，標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。

2. 加樣一般運用加液器，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標本、加酶結(jié)合物、加底物和加間斷液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴，避免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴。

3.在成批手藝檢測中，還應(yīng)留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原反響和酶促反響時間不一致，對競爭法及定量檢測影響很大，不留神可能會導(dǎo)致過錯效果或定量不準。

Elisa試劑盒的操作注意事項

洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議實驗勝敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除掉未結(jié)合的反響物，間斷抗原抗體反響，除掉標本中與反響無關(guān)的成分、游離的酶標物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。

斷定效果須運用Elisa試劑盒測讀儀，比色法判讀可選擇單波長或雙波長，根據(jù)反響液顏色的不同選用不同波長的濾光片，以空白孔校零測定反響孔的吸光度值。具有杰出的重復(fù)性。