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ELISA試劑盒的測定原理

測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應，所以任何的診斷劑離不開好的原料，如抗原抗體，酶等。以前用于測定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原動物后獲得的多抗體和使用雜交瘤技術得到的抗體，而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來，隨著分子生物學的發展，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等測定試劑幾成為現實的新一代試劑，各種新型使用的測定方法也不斷出現。

ELISA試劑盒的試驗原理

試劑盒是固相夾心法酶聯吸附實驗（ELISA）.已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。

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Elisa試劑盒有哪些需要注意的？

1. 跟著病況的進展或由其他因素影響，某些抗體在機體內的含量發作大幅動搖，因此有必要對標本進行預處理。間接法測定中，標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。

2. 加樣一般運用加液器，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標本、加酶結合物、加底物和加間斷液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴，避免交叉污染。加酶結合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴。

3.在成批手藝檢測中，還應留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反響和酶促反響時間不一致，對競爭法及定量檢測影響很大，不留神可能會導致過錯效果或定量不準。