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              江蘇檢測試劑盒生產廠家誠信企業「夢犀生物」

              發布時間:2021-08-21 22:14  

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              制備方法編輯包括以下步驟:1)抗原表位的計算機篩選;2)抗原的制備;3)的采集;4)間接ELISA方法的建立;5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證;6)試劑盒的穩定性驗證;7)對屠宰場進行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩定性合格、重復性好。應用本發明制得的試劑盒能有效檢出豬的戊型病毒,適用于大批量發病樣本的檢測,可用于豬戊肝的快速診斷,并預防、控制豬戊毒的流行和阻斷戊毒由豬向人傳播。



              加酶標:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“ ”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。



              操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

              2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

              3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

              4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

              5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板)。

              6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

              7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。





              哺乳動物細胞溶質中的SOD呈綠色,并且由兩種亞單位構成,一種含有銅,另一種含有鋅(Cu/Zn-SOD)。線粒體和細菌SOD為紅紫色并含有錳(Mn-SOD)。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。為了測定SOD的活性,研究人員嘗試了許多間接的或者直接的方法,其中,NBT的間接法為常用,因為它很方便。但是,NBT法有幾個缺點,例如生成的染料水溶性差,而且會和氧化酶的還原型發生反應。雖然cytochrome C法也常被用來做SOD檢測,但它和超氧化物反應過于劇烈,不能測定低水平的SOD。



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