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發布時間：2021-04-26 17:32
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ELISA試劑盒的用途
ELISA的基礎是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或仍保持其活性，酶標記的抗原或既保留其活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的或抗原）與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定。
然而，影響Elisa試驗結果的因素很多，故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。
ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項
ELISA實驗通用規則
Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案
顯色淡，靈敏度偏低
1 試劑盒未充分平衡 試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）
2 樣品不適合做ELISA檢測 樣品一般選擇培養上清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優化檢測的條件（例如稀釋液的成分）
3 酶標板在貯存或洗后拍干時過分干燥 防止板過于干燥
4 包被遭到破壞 操作溫和，移液槍不能碰到孔底
5 樣本和孵育條件不合適 按照說明書條件，建議孵育過程中全程振蕩孵育。
6 洗滌浸泡時間過長 按照說明書操作。勿人為增加浸泡時間；
7 偶聯HRP試劑污染 棄去試劑，重新配置
8 錯誤的稀釋偶聯HRP試劑 棄去試劑，重新配置
9 TMB底物孵育時間過短，因非人為因素影響，需要優化孵育時間 確定合適的孵育時間：人為判定-高濃度的標準品出現深藍色；S4-5有淡藍色；機器判定620 nm波長下測定OD值達到0.6-0.65
10 樣本濃度過高或存在基質效應 建議做不同稀釋倍數，確認樣本稀釋倍數。
11 濾光片設置有問題或者波長選擇不對 確認儀器設置及選擇正確的波長檢測。
12 酶標板不適合做ELISA 不能使用細胞培養板，建議使用ELISA高吸附力板子。
