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              發(fā)布時間:2021-06-22 06:59  

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              {微生物}培養(yǎng)



              ——微生物培養(yǎng)——

              指將微生物接種到培養(yǎng)基內(nèi),經(jīng)一定條件使微生物生長繁殖。接種的方法有 6種。①涂布法:將純菌或含菌材料均勻地涂布在固體培養(yǎng)基表面。②劃線法:用接種環(huán)沾取含菌材料,在固體培養(yǎng)基表面劃線。③傾注法:取少許含菌材料放入無菌培養(yǎng)皿中,然后傾入已融化并已冷卻至48℃左右的瓊脂滅菌培養(yǎng)基,搖勻后冷卻凝固。④點植法:用接種針在固體培養(yǎng)基表面接觸幾點。⑤穿刺法:用接種針沾取的微生物經(jīng)穿刺而進(jìn)入半固體深層培養(yǎng)基中。⑥浸洗法:用接種針挑取含菌材料,在液體培養(yǎng)基中洗下。培養(yǎng)方法則根據(jù)微生物對氧的要求情況分為需氧和厭氧兩種。需氧培養(yǎng)是指必須在有氧環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng),必要時用振蕩或通氣攪拌達(dá)到充分供氧;厭氧培養(yǎng)是培養(yǎng)過程一直保持在少氧或無氧的環(huán)境中。厭氧的方法可用物理、化學(xué)、生物等辦法使培養(yǎng)容器內(nèi)的氧氣部分或全部消除。通常用抽真空方法,有時將兩種方法結(jié)合使用,使厭氧培養(yǎng)更為理想?!称肺⑸镯椖勘尘啊吃床≡⑸镆鸬氖吃葱约膊∈鞘称钒踩暮诵膯栴}。接種、培養(yǎng)是食品微生物應(yīng)用、研究過程中基本和必不可少的方法。


              {微生物檢測}微生物接種





              將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過程叫做接種。

              接種和分離工具

              1.接種針 2.接種環(huán) 3.接種鉤 4.5.玻璃涂棒 6.接種圈 7.接種鋤 8.小解剖刀

              常用的接種方法有以下幾種:

              1、劃線接種

              這是zui常用的接種方法。即在固體培養(yǎng)基表面作來回直線形的移動,就可達(dá)到接種的作用。常用的接種工具有接種環(huán),接種針等。在斜面接種和平板劃線中就常用此法。

              2、三點接種

              在研究霉菌形態(tài)時常用此法。此法即把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點,讓它各自獨立形成菌落后,來觀察、研究它們的形態(tài)。除三點外,也有一點或多點進(jìn)行接種的。

              3、穿刺接種

              在保藏yanyang junzhong或研究微生物的動力時常采用此法。做穿刺接種時,用的接種工具是接種針。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基。③傾注法:取少許含菌材料放入無菌培養(yǎng)皿中,然后傾入已融化并已冷卻至48℃左右的瓊脂滅菌培養(yǎng)基,搖勻后冷卻凝固。它的做法是:用接種針蘸取少量的junzhong,沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺,如某細(xì)菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。

              穿刺接種的兩種方法:垂直法和水平法



              抑菌效力

              接種大腸埃希菌、金黃色球菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中,30~35℃培養(yǎng)18~24小時;接種白色的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中,20~25℃培養(yǎng)24~48小時。上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為50~100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基中,20~25℃培養(yǎng)5~7天,加入3~5ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液,將孢子洗脫。它的做法是:用接種針蘸取少量的junzhong,沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺,如某細(xì)菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。然后,采用適宜方法吸出孢子懸液至無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)50~100cfu的孢子懸液。





              抑菌效力-培養(yǎng)基


              培養(yǎng)基的制備

              1.胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基

               胰酪胨17.0克

              氯化鈉5.0克

              大豆木瓜蛋白酶消化物3.0克

              磷酸氫二鉀2.5克

              葡萄糖(一水合)2.5克

              水1000mL

              除葡萄糖外,取上述成分,混合,微溫溶解,濾過,調(diào)節(jié) pH 值使滅菌后在 25℃的 pH 值為 7.3±0.2,加入葡萄糖,分裝,滅菌。

              胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基置 20~25℃培養(yǎng)。

              2. 胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基

              胰酪胨15.0克

              大豆木瓜蛋白酶水解物5.0克

              瓊脂15.0克

              水1000ml

              除瓊脂外,取上述成分,混合。微溫溶解,調(diào)節(jié) pH 值使滅菌后在 25℃的 pH 值為 7.3±0.2,加入瓊脂,加熱溶化后,搖勻,分裝,滅菌。

              3.沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基

              沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基照微生物限度檢查法(附錄ⅩⅢ C)制備。




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