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發(fā)布時間：2021-01-09 22:00
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固相萃取柱萃取步驟
1. 柱預(yù)處理（柱活化）
用適當(dāng)?shù)娜軇┝芟碨PE 柱，以使吸附劑保持濕潤，可以吸附目標(biāo)化合物或干擾化合物。不同模式固相萃取小柱活化用的溶劑不同，其目的有2 個：一是除去填料中可能存在的雜質(zhì)；二是使填料溶劑化，提高固相萃取的重現(xiàn)性。
2. 上樣
將液態(tài)或溶解后的固態(tài)樣品倒入預(yù)處理后的SPE 柱，然后利用抽真空、加壓或離心的方法使樣品通過SPE柱，在該步驟中，分析物被保留在吸附劑上。
3. 淋洗和洗脫
樣品進(jìn)入SPE柱、目標(biāo)化合物被吸附后，視分離模式和樣品性質(zhì)而定，可采用適當(dāng)?shù)南疵搫⒛繕?biāo)化合物直接淋洗下來；也可先將干擾化合物淋洗掉，再用適當(dāng)?shù)南疵搫⒛繕?biāo)化合物洗脫，通常采用后一種方法更有利于樣品的凈化。淋洗和洗脫同上所述，可采用抽真空、加壓或離心的方法使淋洗液或洗脫液流過吸附劑。
固相萃取柱的影響因素
流速
流速的控制對SPE至關(guān)重要，流速過大將引起SPE柱的穿漏，流速太小則處理速度太慢。柱預(yù)處理過程中流速適中，保證溶液充分濕潤吸附劑即可，上樣和洗脫過程則要求流速盡量慢些，以使分析物盡量保留在柱內(nèi)或達(dá)到完全洗脫，否則會導(dǎo)致分析物流失，影響回收率的大小。尤其離子交換過程，進(jìn)行比較緩慢，應(yīng)采用較低的流速（0.5~2.0 mL/min）。
固相萃取柱的操作方法介紹
一、反相萃取柱操作
從極性基體中提取非極性的樣品
1、活化:以3-5毫升去離子水(或緩沖液)淋洗萃取柱并保持萃取柱濕潤
2、上樣:以合適的流速使樣品均勻通過萃取柱
3、清洗:以5毫升適當(dāng)極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱(常用的有純水,緩沖液,水/溶劑混合液)
4、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升非極性溶劑分批洗脫至收集容器
二、正相萃取柱操作
從非極性基體中提取極性的樣品
1、活化:3-5毫升非極性溶劑淋洗萃取柱
2、清洗:以5毫升適當(dāng)非極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱
3、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升極性溶劑分批洗脫至收集容器
三、離子交換萃取柱
提取帶電荷的樣品
1、活化:以3-5毫升去離子水/或低離子強(qiáng)度的緩沖液淋洗萃取柱
2、上樣:以較低的流速,使樣品均勻通過萃取柱
3、清洗:5毫升去離子水/或低離子強(qiáng)度的緩沖液淋洗萃取柱
4、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升高離子強(qiáng)度的緩沖液洗脫至收集容器
固相萃取柱回收率低的原因及解決方法
固相萃取柱回收率低：
（1）可能原因：清洗溶劑選擇不當(dāng)；洗脫能力太強(qiáng)
解決方法：使用正確的清洗溶劑；選擇洗脫能更弱的溶劑
（2）可能原因：載樣時流速過快
解決方法：重力自然載樣或控制載樣流速≤1mL/min
（3）可能原因：SPE小柱太小
解決方法：?用更大規(guī)格的SPE小柱?用選擇性更強(qiáng)的SPE小柱?用載樣量更大的SPE小柱
（4）可能原因：洗脫前SPE小柱清洗溶劑抽干不充分
解決方法：充分抽干沖洗溶劑
（5）可能原因：洗脫不充分
解決方法：增加洗脫劑的體積，增加洗脫劑的強(qiáng)度；用更小規(guī)格的SPE小柱
（6）可能原因：洗脫時流速過快或過慢
解決方法：控制流速1～2ml/min
