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發(fā)布時(shí)間:2020-12-24 18:40  
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分光光度計(jì)與酶1標(biāo)儀的主要區(qū)別
分光光度計(jì)和酶1標(biāo)儀都是試驗(yàn)室常用的兩種儀器,它們的測(cè)定原理是相同的,都是運(yùn)用朗伯-比耳規(guī)矩,測(cè)定的都是樣本的吸光度。
酶1標(biāo)儀依照功用的不同區(qū)分,能夠分為(1)光吸收酶1標(biāo)儀(可見(jiàn)酶1標(biāo)儀,紫外/可見(jiàn)酶1標(biāo)儀)(2)熒光酶1標(biāo)儀(3)化學(xué)發(fā)光酶1標(biāo)儀。
分光光度計(jì)依照波長(zhǎng)及運(yùn)用范疇的不同能夠分為:(1)可見(jiàn)光分光光度計(jì)(2)紫外分光光度計(jì)(3)紅外分光光度計(jì)(4)熒光分光光度計(jì)(5)原子吸收分光光度計(jì)。

操作方法1.接通電源,打開(kāi)儀器開(kāi)關(guān),掀開(kāi)樣品室暗箱蓋,預(yù)熱10分鐘。
2.將靈敏度開(kāi)關(guān)調(diào)至"1"檔(若零點(diǎn)調(diào)節(jié)器調(diào)不到"0"時(shí),需選用較。)
3.根據(jù)所需波長(zhǎng)轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)選擇鈕。
4.將空白液及測(cè)定液分別倒入比色杯3/4處,用擦鏡紙擦清外壁,放入樣品室內(nèi),使空白管對(duì)準(zhǔn)光路。
5.在暗箱蓋開(kāi)啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器,使讀數(shù)盤(pán)指針指向t=0處。
6.蓋上暗箱蓋,調(diào)節(jié)"100"調(diào)節(jié)器,使空白管的t=100,指針?lè)€(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿,分別讀出測(cè)定管的光密度值,并記錄。
7.比色完畢,關(guān)上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈。

光的性質(zhì)
光的波粒二相性
? 人們對(duì)電磁輻射兩重性的認(rèn)識(shí)爭(zhēng)論了很久,有兩種說(shuō)法:一是粒子說(shuō),把光看成微粒子,認(rèn)為光與物質(zhì)相互作用的現(xiàn)象(如吸收、發(fā)射、反射等)表明光是具有不連續(xù)能量的微粒,光具有粒子性;二是波動(dòng)說(shuō),把光看成一種波,它可以反射、衍射、折射、散射、傳播等,它可用速度、頻率、波長(zhǎng)等參數(shù)來(lái)描述,這表明光具有波的性質(zhì)。到1900年,普朗克提出量子論,把電磁輻射的粒子說(shuō)和和波動(dòng)說(shuō)聯(lián)系起來(lái),并提出了光量子(光子)能量與電磁輻射的頻率有關(guān),其數(shù)學(xué)表達(dá)式為
? E=hv=hc/λ
? E:輻射的光子能量J
? h:普朗克常數(shù)
? v:輻射的頻率
? c:光速
? λ:波長(zhǎng)
分光光度計(jì)的重要配件—— 比色杯
比色杯按照材質(zhì)大致分為石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根據(jù)不同的測(cè)量體積,有比色杯和毛細(xì)比色杯等。一般測(cè)試核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不適合比色法測(cè)定。因?yàn)榉磻?yīng)中的染料(如考馬斯亮蘭)能讓石英和玻璃著色,所以必須采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不適合用于在紫外范圍內(nèi)測(cè)試樣品。
由于另外測(cè)試的樣品量不同,所以一般分光光度計(jì)廠家提供不同容積的比色杯以滿(mǎn)足用戶(hù)不同的需求。目前市場(chǎng)已經(jīng)存在一種既可用于核酸、紫外蛋白質(zhì)定量,亦可用于蛋白比色法測(cè)定的塑料杯,樣品用量?jī)H需50μl,比色杯單個(gè)無(wú)菌包裝,可以回收樣品。如Eppendorf UVette®塑料比色杯,是目前比色杯市場(chǎng)上一個(gè)革新。隨著生命科學(xué)以及相關(guān)學(xué)科發(fā)展,對(duì)此類(lèi)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究提出更高的要求,分光光度計(jì)將是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室不可缺少的儀器,也成為微生物、食品、制藥等相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的必備設(shè)備之一。

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